佐剂

佐剂又称免疫佐剂,是指所有和抗原一起注射或预先注射,能增加机体对抗原的免疫应答或改变应答类型的一类物质。免疫佐剂的作用:
①能使弱抗原物质增强抗原性;
②增加特异性循环抗体水平,或产生有效的保护性免疫;
③改变所产生的循环抗体类型;
④增强细胞介导的超敏反应能力;
⑤保护抗原(特别是DNA、RNA)不受体内酶的分解。
佐剂对某些分子量小的多糖或多肽抗原性微弱的物质,尤能增强其产生特异性反应的作用。
卡介苗、细菌内毒素、百日咳菌都有佐剂作用。佐剂与某些组织抗原混合注射,易引起变态反应及自身免疫性疾病。实验室常用的佐剂是弗氏佐剂,它可分为:
不完全弗氏佐剂,由1~6份石蜡油和1份羊毛脂经充分混合而成;
完全弗氏佐剂,在不完全弗氏佐剂中,于使用前添加灭活的卡介苗(2~20mg/ml)混合而成。实验动物在首次注射抗原时,所使用的抗原通常与完全弗氏佐剂混和,而在以后作再次强化注射时,则只需与不完全弗氏佐剂混和即可。
佐剂与抗原以1:1比例混和,待充分乳化直至静置后不发生油水分离时即可用以注射动物。
【佐剂对抗原的作用】
①增加抗原的表面积。佐剂吸附抗原后增加抗原的表面积,并且改变活性基因的构型, 因而增强抗原的免疫原性。对小分子量可溶性抗原或半抗原,经胶体颗粒吸附后,可提高抗体产量。②增强T和B细胞的协同作用。佐剂和抗原被巨噬细胞吞噬,对抗原加工处理,赋予较强的免疫原性,促进T淋巴细胞免疫力,并加强T淋巴细胞与B淋巴细胞的协同作用。③延长抗原在组织内的贮存时间使抗原降解和释放缓慢。佐剂可引起局部肉芽肿,延长抗原在局部组织内的贮存时间,减慢抗原的降解速度,使抗原缓慢释放。例如短小棒状杆菌所造成的滞留观象远比可溶性抗原持久。前者可长达几星期,后者仅2~3天。接种此菌后局部可引起肉芽肿,但不发展为上皮样细胞与多核巨细胞,也不引起局部组织坏死。氢氧化铝胶与抗原混合后,抗原吸附在铝胶表面,能延长抗原在体内存在的时间,并缓慢释放抗原,提高血中抗体的浓度,并可减少免疫接种次数。
【佐剂对机体的作用】
①引起细胞浸润。佐剂能引起细胞浸润,出现巨噬细胞、淋巴细胞及浆细胞聚集,促进这些细胞增殖,发挥更大的作用。例如注射FCA后,从组织切片可见,注射局部有巨噬细胞、上皮样细胞以及淋巴细胞和浆细胞聚集成团。②加速淋巴细胞的转化。佐剂能加速淋巴细胞转化成为效应细胞,生成更多的致敏淋巴细胞及转变成为浆细胞产生抗体。③膜和胞浆的变化。淋巴细胞被配体刺激后,膜上的磷脂被酶激活,使膜上或邻近的部位发生膜运动及合成新的膜。随之在胞浆和细胞核中也要出现相应的改变,胞内AMP和GMP浓度的升降,起着重要的调节作用和影响。巨噬细胞经佐剂作用后,也出现类似的改变,主要表现为膜活性增加和分泌辅助性因子。④细胞功能的改变。巨噬细胞被佐剂刺激和激活后,出现的主要变化,包括数量增多,膜表面积增大,产生大量辅助因子和前列腺素等调节因子。T和B细胞受佐剂作用后,最大的改变是细胞数目增多,进入细胞增殖周期,膜表面成分发生改变,产生大量辅助因子(LK)。B细胞则分化为浆细胞,并分泌大量的抗体。
【矿物油佐剂】
矿物油佐剂是以符合药用标准的轻矿物油(商品名称白油),加乳化剂再与适当比例的水溶液抗原混合,经乳化而成的乳剂型疫苗。“乳剂”是将一种溶液分散成细小的微粒,混悬于另一种不相溶的液体中所成的分散体系。被分散的物质称为分散相(内相),承受分散相的液体称连续相(外相),两相间的界面活性物质称为乳化剂。当以水为分散相,以加有乳化剂的油为连续相时,制成的乳剂为油包水型乳剂(水/油型或W/O型),反之为水包油型乳剂(油/水型或O/W型)。W/O型乳剂疫苗佐剂活性较高,但性状较粘稠,注射于动物机体不易分散。O/W乳剂的性状虽较稀,但佐剂活性很低。为此可将W/O型乳剂疫苗,再加2%吐温-80生理盐水搅拌使成双相乳剂型,即水—油—水型或称多型乳剂。双相型乳剂疫苗粘度低,注射后易于分散,局部反应轻微,佐剂效应亦良好。
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