芹糖异甘草苷

甘草为豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch.)、胀果甘草（GlycyrrhizainflateBat.）或光果甘草（GlycyrrhizaglabraL.）的干燥根及根茎。收载于中国药典2010年版（一部），味甘，平；归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的功效。主要产于内蒙古、甘肃、新疆、陕西、东北、山西等地区。主要有效成分为皂苷类和黄酮类化合物。芹糖异甘草苷属甘草黄酮类的代表成分主要有甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素等，现代研究表明，甘草苷、芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷等为代表的甘草总黄酮类，具有抗心肌缺血以及抑制艾滋病病毒增殖的作用。

具有抗心肌缺血以及抑制艾滋病病毒增殖的作用基于甘草相关成分的药理学研究报道,单纯依据甘草苷及甘草酸的含量指标不能全面反映甘草的质量,因甘草中的其他黄酮类成分也具明显作用。采用高效液相色谱方法同时测定了甘草中的芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷和甘草酸的含量,较全面反映了甘草药效的物质基础。对流动相及检测波长进行了考察,比较了甲醇-水、乙腈-水及乙腈-1%～3%醋酸水系统,乙腈-水相对于甲醇-水系统分离效果较好,加入醋酸后进一步提高分离效果,最终选择乙腈-3%醋酸水系统作为流动相。采用DAD检测器,对样品进行全波长扫描,比较各波长检测结果,发现在本实验选定波长下各成分普遍有较大吸收,最终选择254nm对样品进行检测。取干燥的甘草5.0kg，分别用8倍量和6倍量的95%乙醇水溶液回流提取2次，每次1h。合并2次提取液，减压浓缩到一定浓度后，置于装有D101大孔树脂的色谱柱，分别用水和40%、95%乙醇洗脱，收集40%乙醇洗脱液，减压浓缩到适宜浓度后，进行半制备液相色谱分离，乙腈-水（10∶90→100∶0）梯度洗脱，得到化合物1（3.9mg）、2（4.6mg）、3（3.3mg）和4（3.0mg）。收集95%乙醇洗脱液，经ODS中压柱色谱进一步分离，使用55%甲醇和纯甲醇溶剂洗脱。收集纯甲醇洗脱液进行减压浓缩后冷冻干燥，得到干燥粉末（28g）。取0.43g干燥粉末用甲醇溶解，半制备液相色谱分离，乙腈-水得到芹糖异甘草苷（2.7mg）。白色粉末，可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂，来源于甘草。抗心肌缺血，抑制艾滋病病毒增殖。