星孢菌素

Staurosporine具有从抗真菌到抗高血压的生物活性。 对这些生物活性的兴趣导致了化学和生物学方面的大量研究工作以及抗癌治疗潜力的发现。星形孢菌素的主要生物活性是通过预防ATP与激酶的结合来抑制蛋白激酶。这是通过星形孢菌素对激酶上的ATP结合位点的更强亲和力来实现的。

Staurosporine是一种典型的ATP竞争性激酶抑制剂，因为它以高亲和力结合许多激酶，但选择性很小。激酶袋的结构分析表明，在与星形孢菌素相对位置保守的主链原子有助于星形孢菌素的杂乱。

星孢菌素(staurosporine,sta，结构式如下式(1))是一种具有较好药学和生物活性的天然产物。该化合物于1997年由omura最早是从土壤放线菌中分离得到的吲哚咔唑类生物碱。x单晶衍射实验分析表明，其中央为吲哚咔唑环，环下方的n上连接小分子糖，上面连接的是内酰胺环。sta为强pkc抑制剂(ic50＝2.7nm)，主要作用于细胞信号转导通路中各种激酶、拓扑异构酶以及细胞周期调控因子。星孢菌素是作为米哚妥林的关键中间体，其生产工艺直接影响米哚妥林的生产成本和质量。该方法是在发酵完成后，用氨水将培养基的ph值调整为10，在室温下加入乙酸正丁酯进行提取；加入hcl水溶液，将产品转移到水溶液中；用氨水将ph值调节到10，用乙酸乙酯萃取，浓缩得到褐色混凝剂；用乙醚洗涤，除去脂肪；硅胶层析，洗脱剂氯仿-甲醇，采用薄层控制，浓缩，干燥得纯品。纯度达99％以上。Staurosporine (CGP 41251, Antibiotic AM-2282, STS, AM-2282)是一种有效的PKC抑制剂，在无细胞试验中作用于PKCα，PKCγ 和PKCη，IC50分别为2 nM，5 nM 和 4 nM，对PKCδ(20 nM)和PKCε(73 nM作用较弱，对PKCζ (1086 nM)的活性很低。同时 对其他的激酶PKA, PKG, S6K, CaMKII, 等也显示抑制活性。Phase 3。

Target	Value
PKCα (Cell-free assay)	2 nM
c-Fgr (Cell-free assay)	2 nM
phosphorylase kinase (Cell-free assay)	3 nM
PKCη (Cell-free assay)	4 nM
PKCγ (Cell-free assay)	5 nM

Staurosporine 也强抑制HeLa S3细胞，IC50为4 nM。Staurosporine 也抑制多种其他蛋白激酶，包括PKA, PKG, 磷酸激酶, S6 激酶, 肌球蛋白轻链激酶(MLCK), CAM PKII, cdc2, v-Src, Lyn, c-Fgr, 和Syk ， IC50分别为 15 nM, 18 nM, 3 nM, 5 nM, 21 nM, 20 nM, 9 nM, 6 nM, 20 nM, 2 nM, 和 16 nM。 Staurosporine (1 μM) 诱导 PC12细胞90%以上凋亡,这种作用可被过量表达的Bcl-2抑制,或者zVAD-fmk, cycloheximide (10 μM) 及actinomycin D (5 μM)处理也可抑制。相应地, Staurosporine处理，诱导细胞内游离钙水平 [Ca通过caspase-8激活和Bid 分裂，功能性caspase-3的表达可增强Staurosporine诱导MCF7细胞死亡。 1 μM Staurosporine处理，只部分抑制IL-3刺激的Bcl2 磷酸化，而完全阻断PKC调节的 Bcl2磷酸化。 Staurosporine 诱导人类包皮成纤维细胞AG-1518凋亡,根据溶酶体组织蛋白酶D调节的 细胞色素 c释放和 caspase 激活。 除了激活传统线粒体凋亡通路, Staurosporine触发一种新型内在凋亡通路, 依赖Apaf-1存在时对caspase-9的激活。

在局部贫血前，使用Staurosporine(0.1-10 ng)预处理局部贫血沙鼠和大鼠模型，可防止神经元损伤，这种作用存在剂量依赖性，说明CAl锥体细胞死亡涉及PKC。