碱性木聚糖酶（Basic Xylanase，BAX）测定试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
碱性木聚糖酶（Basic Xylanase，BAX）测定试剂盒测定意义：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，BAX一般分离自最适生长pH为9 -11的微生物。
测定原理：
BAX在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算BAX活力。
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制：
缓冲液：液体65mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。（若出现白色絮状或颗粒状沉淀，可60℃加热溶解后使用）。
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃避光保存。
粗酶提取：
1. 发酵液：发酵液于8000g，4℃，离心15min，取上清，作为待测样品。
2. 酶干粉：称约0.1mg，加1mL缓冲液溶解待测。
3. 组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL缓冲液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃，离心10min，取上清待测。
碱性木聚糖酶（Basic Xylanase，BAX）测定试剂盒测定操作表：
| 对照管 | 测定管 |
样品（μL） | 200 | 200 |
缓冲液（μL） | 300 | 300 |
试剂一（μL） |
| 200 |
试剂二（μL） | 300 |
|
混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应30min，立即沸水浴10min灭活。(注意不要让盖子爆开，以免进水，改变了反应体系) |
试剂一（μL） | 200 |
|
试剂二（μL） |
| 300 |
混匀，沸水浴显色5min(注意不要让盖子爆开，以免进水改变了反应体系)，1mL玻璃比色皿，540nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 |
BAX计算公式：
标准曲线：y = 2.8432x - 0.0293，R2 = 0.9985
1. 按液体体积活力计算：
酶活定义：50℃，pH9.0条件下，每毫升液体样本每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX活力（nmol/min/mL）= （ΔA+0.0293）÷2.8432÷150÷T×稀释倍数×106
= 391× (ΔA+0.0293)
2. 按蛋白浓度计算：
酶活定义：50℃，pH9.0条件下，每毫克蛋白每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.0293）÷2.8432÷150÷T×稀释倍数×106÷Cpr
= 391×(ΔA +0.0293 ) ÷Cpr
3. 按鲜重计算：
酶活定义：50℃，pH9.0条件下，每克样本每分钟分解木聚糖产生1nmol 还原糖所需的酶量为一个碱性木聚糖酶的活力单位。
BAX活力（nmol/min/g鲜重）= （ΔA +0.0293）÷2.8432÷150÷T×稀释倍数×106÷W
= 391×(ΔA +0.0293 ) ÷W
150：木糖的分子量；T：反应时间，30min；稀释倍数=V反总÷V样=1000µL÷200µL=5；
106：转化因子，即1mg/mL=106ng/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1. 吸光度变化应该控制在0.01~0.8之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变；也可以延长或者缩短反应时间。
2. 试剂盒2-8℃保存，保质期3个月，建议尽快使用。
关键字： 碱性木聚糖酶（Basic Xylanas;碱性木聚糖酶（Basic Xylanas;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科学领域，提供科研类试剂、耗材、仪器、技术服务的生物企业。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学等 。旗下拥有 “雅吉生物”、“晶风生物”、“彩佑实业”、“GTX” 品牌。通过公司各部门员工的共同努力在行业内拥有较高知名度，深得新老客户厚爱，本着“优质、服务、信誉”的精神，坚持以优良的技术、优质的产品、良好的信誉为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。
公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持，物流售后服务等多部门联动服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户，雅吉生物的试剂盒，在国内众多重点实验室广泛使用，深受广大科研人员好评，先后在权威杂志文章中被引用。
本公司郑重承诺：质量保证、供货及时、服务周到。