布雷非德菌素A Brefeldin A（蛋白转运抑制剂）
关键词：淋巴细胞活化（Lymphocyte Activation），胞内细胞因子表达，流式分析FACS，PKC激活剂PMA，钙离子载体，蛋白转运阻断剂，CAS：20350-15-6
细胞因子（Cytokines）表达水平高低直接反映细胞在特异性刺激剂（物）下的应答活动，免疫学研究通常使用适当的刺激剂来激活细胞应答，并通过某些药物如莫能霉素（monensin）或布雷非德菌素A（Brefeldin A，BFA）作用以阻断胞内高尔基体介导的蛋白转运，促使细胞因子累积，提高细胞因子的胞内信号，从而能借助流式分选技术（FACS）检测细胞因子的表达水平。细胞因子表达具有自身的特征性。
常见的蛋白转运抑制剂：
- Monensin莫能霉素，CAS：22373-78-0
简单描述：天然离子载体(ionophore)，选择性结合单价阳离子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+，并将这些阳离子转运到细胞膜内。可破坏高尔基体，抑制细胞内的蛋白转运，常用作蛋白转运抑制剂，用于抑制细胞因子等分泌型蛋白的分泌，使其保留在细胞内。
- Brefeldin A（BFA，布雷非德菌素A），CAS：20350-15-6
简单描述：一种常用的蛋白转运抑制剂，特异性地可逆地阻断蛋白质从内质网（ER）转运到高尔基体（Golgi）。经BFA处理，高尔基体很快被破坏并融合到内质网上，该过程呈现能量、温度和微管依赖性。BFA是一种真菌代谢物，最初曾用作抗病毒试剂，现主要用于研究蛋白转运。BFA也常被用于抑制细胞因子等蛋白的分泌，并用于增强分泌蛋白的免疫染色检测。BFA可激活神经鞘磷脂循环（sphingomyelin cycle），还可诱导一些肿瘤细胞发生凋亡。
一些应用实例：
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml)
Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days
PMA (20 ng/ml)
plus
ionomycin (1μg/ml)
Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml)
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Monensin Solution (1,000×) 莫能霉素溶液（1,000×）
Monensin, Sodium Salt 莫能霉素（钠盐）
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