"MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌细胞系 细胞形态:上皮细胞样 细胞生长:贴壁 细胞背景资料:该细胞系由CailleauR在1976年从一名48岁的患有转移性乳腺癌的白人女性的心包渗出液中分离建立的。该细胞表达FGF的受体。 EFM192B细胞系相关产品:COLO-394细胞、NCI-H2227细胞、Helacyton gartleri细胞 U-251细胞系相关产品:Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞 Colon 26细胞系相关产品:Jiyoye (P-2003)细胞、Ramos细胞、MHCC97细胞 A549ATCC细胞系相关产品:H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞 细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌细胞系 如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。 细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支) 细胞传代方法:1:2-1:4传代;2-3天换液1次 细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。 细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 CV-1细胞系相关产品:CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞 SN12-PM6细胞系相关产品:Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞 SKML-28细胞系相关产品:CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞 TALL1细胞系相关产品:VERO76细胞、293-H细胞、SHZ-88细胞 MLTC-1细胞系相关产品:MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞 细胞生长特性:贴壁生长 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌细胞系 细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。 细胞形态特性:上皮样;多角形 P3X63Ag8细胞系相关产品:HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞 HM1900细胞系相关产品:Hs 636.T细胞、RFL6细胞、Immortal Pig Intestinal-2I细胞 Wayne State University-Head and Neck 13细胞系相关产品:NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞 J82 COT细胞系相关产品:TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞 SK LU 1细胞系相关产品:EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞 MOPC细胞系相关产品:HS-294细胞、GM3570细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞 TC-1 [Mouse lung]细胞系相关产品:Hs 274细胞、HuH-28细胞、NCIH2023细胞 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌细胞系 SUD4细胞系相关产品:HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞 SK UT 1细胞系相关产品:SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞 HEK-293-EBNA细胞系相关产品:32Dcl3细胞、Bac 1.2F5细胞、BALB/3T3 clone A31细胞 PIG3细胞系相关产品:HT 29细胞、786-O RCC细胞、JURKAT E-61细胞 SW626细胞系相关产品:XWLC-05细胞、VMRC-LCD细胞、HCV29细胞 CMT-64细胞系相关产品:GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞 SK-N-BE2C细胞系相关产品:MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞 SW839细胞系相关产品:RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞 MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞 MKN1细胞系相关产品:MDCK2细胞、KLN-205细胞、Ly3细胞 MT-3 [Human leukocytes]细胞系相关产品:PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞 Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品:SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞 McA-RH 8994细胞系相关产品:A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞 SCC VII细胞系相关产品:AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞 526mel细胞系相关产品:MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞 MXI细胞系相关产品:Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞 DU-145细胞系相关产品:HRGEC细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、Hx-147细胞 EBNA-293细胞系相关产品:SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞 Centre Antoine Lacassagne-33细胞系相关产品:Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞 Hepatoma-22细胞系相关产品:NCI.H522细胞、Colo320细胞、B-104细胞 BAC1.2F5细胞系相关产品:LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞 SR786细胞系相关产品:NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞 Opossum Kidney细胞系相关产品:SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞 A-673细胞系相关产品:NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞 Hs 766.T细胞系相关产品:NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞 MM96L细胞系相关产品:SF-767细胞、DoHH2细胞、IEC18细胞 HT-3细胞系相关产品:TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞 NCIH208细胞系相关产品:L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞 MC3T3E1细胞系相关产品:Panc10.05细胞、RH7777细胞、UT7细胞 Sp2/mIL-6细胞系相关产品:MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞 K1细胞系相关产品:McCoy B细胞、PLA-802细胞、PNEC30细胞 PL5细胞系相关产品:PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞 LMH细胞系相关产品:SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞 KYSE140细胞系相关产品:H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞 TE5细胞系相关产品:MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞 Hs 737.T细胞系相关产品:293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞 RGM1细胞系相关产品:C1R细胞、HT-29细胞、SKMel-28细胞 BALB/c 3T3 clone A31细胞系相关产品:SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞 Hs683细胞系相关产品:293-F细胞、LK 2细胞、Line 697细胞 RPE1细胞系相关产品:WM 266-4细胞、H-2195细胞、CCD-112 CoN细胞 RPE1细胞系相关产品:WM 266-4细胞、H-2195细胞、CCD-112 CoN细胞 MGH-UI细胞系相关产品:ASH3细胞、Bovine Turbinate细胞、SK-MEL3细胞 Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞系相关产品:SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞 MDA-MB-453 Cell:人乳腺癌细胞系 SK-N-BE细胞系相关产品:ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞 D-283MED细胞系相关产品:293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞 GBCSD细胞系相关产品:Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞 H322细胞系相关产品:P3-x63-Ag8 653细胞、Jiyoye细胞、293F细胞 MODE-K细胞系相关产品:RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞 Hs 832(C).T细胞系相关产品:H-2085细胞、NW38细胞、HCC-202细胞 870细胞系相关产品:H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞 RPPVEC细胞系相关产品:H209细胞、HCT FET细胞、UACC893细胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞系相关产品:AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞 U-2932细胞系相关产品:Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞 H441细胞系相关产品:HHL5细胞、H748细胞、MNNG/HOS Clone F-5细胞 P3/NS-1细胞系相关产品:3LL细胞、SU-DHL-5细胞、RT-BM 1细胞 "
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