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施托尔-S

施托尔-S, , 结构式
施托尔-S
CAS号:
英文名称:
cytochrome C solution
英文同义词:
cytochrome C solution
中文名称:
施托尔-S
中文同义词:
施托尔-S;细胞色素丙溶液;细胞色素C溶液
CBNumber:
CB02125671
分子式:
分子量:
0
MOL File:
Mol file

施托尔-S化学性质

安全信息

施托尔-S性质、用途与生产工艺

化学性质 

细胞色素C系自猪或牛心中提取的细胞色素C的水溶液,为深红色的澄清溶液,它对于干燥、热和酸稳定。易溶于水,呈碱性。等电点Ph为10.2~10.8。氧化型水溶液呈深红色,在饱和硫酸铵中可溶解,还原型水溶液呈桃红色,溶解度较小。它是生物氧化的一个非常重要的电子传递体。通常外源性的细胞色素C不能进入健康细胞,但在缺氧时,细胞膜的通透性啬,细胞色素C便有可能进入细胞及线粒体内,增强细胞氧化,提高氧的急救和辅助治疗。
细胞色素C注射液为细菌色素C的灭菌水溶液,内含等量的稳定剂双甘氨肽和抗氧化剂亚硫酸氢钠和亚硫酸钠,为橙红色的澄明液体。
注射液用细胞色素C加适宜的赋形剂与抗氧剂,经冷冻干燥制得的无菌制品,为桃红色冻干块状物,易溶于水。

用途 

细胞色素C可用为细胞呼吸激活剂。常用于组织缺氧的急救和辅助用药。适用于治疗由脑缺氧、心肌缺氧和其他组织缺氧引起的一系列症状。也用于促进受损肝细胞再生、骨髓造血机能修得,显著减轻由放疗引起的白细胞减少症。但是有时有局部痉挛、皮疹、发热、口渴、暂时性休克和变态反应等症状应立即停药。使用前或治疗终止再用药时应进行过敏试验,阳性反应者禁用,细胞色素C注射液本身无毒素,但制剂不纯时,易混有热源,它是异性蛋白,可能会引起过敏反应。LD503~6kg。

生产方法 

方法一、以猪心为原料的提取法
绞碎、提取、压滤 取新鲜或冷冻猪心,洗净,去血块、脂肪和肌腱等,切条,用绞肉机绞碎。称取心肌碎肉,加水1.5倍并搅拌均匀,用硫酸(1mol/L)调节之ph4左右常温下不断搅拌,使之提取2h,压滤,取滹液用氨水(1mol/L)中和酸度,使ph4为6.2,离心,分离取清液。心渣再加等量蒸馏水同上重复提取一次,合并两次上清液。
新鲜猪心绞碎→碎肉H2SO4提取;压滤滤液NH3·H2pH6.2分离提取液
中和、吸附、洗脱提取液加入氨水(2mol/L)调到pH7.5,在水浴中静止沉淀杂蛋白,吸取上层清液,每升提取液加入10g沸石,在不断搅拌下,使之吸附40mim,静置,弃去上层清液。用蒸馏水洗涤吸附有细胞色素C的沸石3次,氯化钠(0.2%)洗涤4次,再用蒸馏水洗至洗液澄清。过滤抽干,装入色谱柱中用硫酸铵(25%)溶液洗脱,收集洗脱液。
提取液NH3·H2O;沸石中和;吸附吸附物(NH42SO4(25%)洗涤洗脱液
盐析、洗脱、透析 洗脱液加入固体硫酸铵使浓度达到45%,使杂蛋白完全析出后,过滤。收集滤液,每升滤液中缓缓加入三氯乙酸(20%)25ml,边加边搅拌,待细胞色素C沉淀完全析出后,离心收集细胞色素C沉淀。将沉淀溶于蒸馏水,装入透析袋中,先用常水(指自来水)透析、再用蒸馏水透析到无硫酸根离子为止,过滤,得细胞色素C粗品溶液。
洗脱液(NH42SO4→滤液CCl3CCOH浓缩沉淀物蒸馏水透析粗品溶液
吸附、洗脱、透析 细胞色素C粗品溶液通过已处理好的AmberliteIRC-50(NH+4)树脂柱吸附,然后将树脂移入大烧杯中,用水洗涤到澄清,再分别上柱,用磷酸氢二钠(0.6mpl/L)和氯化钠(0.4mpl/L)混合液洗脱,洗脱速度要慢,流速一般为2ml/min。洗脱液用蒸馏水透析至无氯离子为止,得细胞色素C精品溶液,按猪心质量计算,收率为100~150mg.kg,含量大于20mg/ml。
粗品溶液工Amberlinte;IRC-50树脂吸附吸附物……Na2HPO-NaCl洗脱
洗脱液蒸馏水透析精品溶液
除热原、冻干 取相当于1.5g的细胞色素C精品液,加亚硫酸氢钠200mg,搅拌使之完全溶解,再加双甘肽1.5g混合均匀,用2g/L氢氧化钠(2%)调节pH6.4左右,加注射用水100ml,过滤、除热原,6号垂熔漏斗过滤,抽检测含量合格后,灌注,冷冻干燥,即得每支含15mg细胞色素C的制剂。
精品溶液NaHSO3,双甘肽除热原、冻干细胞色素C制剂
方法二,以新鲜酵母为原料的提取法及工艺过程
破壁、分离 在搅拌下将等量的沸水加入到新鲜压干酵母中,加热至80~855C,然后迅速将2倍量的冰块加至酵母中,骤然冷却至300C以下,使细胞壁完全破裂,过滤分离,得酵母湿饼或浊液。
新鲜压榨酶母等量沸水;冰块破壁;分离湿饼或浊液
提取、净化将酵母湿饼或浊液中加入常水0.65倍及硫酸铵0.075倍量,搅拌使之完全溶解,用氨水调节pH至8, 在搅拌下提取3h或静置提取12~15h,过滤,得净化液。
湿饼或浊液(NH42SO4提取;净化净化液
吸取、洗脱 取净化液加入3.6~4倍的常水,用盐酸调节pH至6.8~7,然后通过弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂112×1柱(80~100目)进行吸附,在树脂上有红色吸附物。挖出红色吸附物,按色泽深浅分别用常水、蒸馏水及pH的硫酸铵溶液(0.05mol/L)洗涤,再按照色泽由深到浅,自上而下重新过柱,力求紧实,再用pH8的硫酸铵(13%)溶液洗脱,得粗品洗脱液。
净化液112×1树脂柱吸附吸附物(NH42SO4洗脱洗脱液
过滤、沉淀、吸附、洗脱、冻干将洗脱液冷却至2~50时,加入固体硫酸铵,搅拌溶解,使其浓度达到80%~85%饱和度(每毫升洗脱约0.41g的硫酸铵),使pH为5~5.5,在2~50的条件下静置1.5~2h,离心,过滤,得滤液。于50以下,加入约滤液0.03~0.05 倍的三氯乙酸( 200g/L即20%),使之沉淀,待沉淀完全后,过滤。收集沉淀物用新鲜蒸馏水使之充分的溶解,过滤,取清液加30~40倍的蒸馏水稀释,调节pH为6.8~7,过滤除去残渣。滤液通过(112cm×1cm) 树脂柱(120~140目)进行吸附,得红色吸附物,挖出红色树脂吸附物,用新鲜蒸馏水充分洗涤至洗液不浑浊。重新上柱,力求紧实,用pH8.2的磷酸氢二钠(0.06mol/L)氯化钠(0.34mol/L)混合液,以15~2

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