磷酸钙法细胞转染试剂盒
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- CAS号:
- 英文名:
- Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
- 英文别名:
- Calcium phosphate cell transfection Kit
- 中文名:
- 磷酸钙法细胞转染试剂盒
- 中文别名:
- 磷酸钙法细胞转染试剂盒
- CBNumber:
- CB13061724
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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磷酸钙法细胞转染试剂盒性质、用途与生产工艺
磷酸钙法细胞转染试剂盒用于磷酸钙法转染细胞,适合于大多数贴壁细胞的转染。磷酸钙法细胞转染试剂盒在传统的磷酸钙细胞转染方法的基础上进行了改良,提高了转染效率,并降低了毒性。用磷酸钙法转染细胞,不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定株。
磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法,磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞,被转染的DNA可以整合到靶细胞的染色体中从而产生有不同基因型和表型的稳定克隆。
磷酸钙转染技术是由Graham等于1973年首创,实验室中转染哺乳动物细胞最广泛使用的方法。尽管磷酸钙转染是一种简单的基因治疗方法,但由于受沉淀条件(比如pH值、温度、盐和DNA的浓度以及沉淀与转染的时间控制等)影响很大,并且磷酸钙易失活,因此这个过程很难标准化。
磷酸钙转染法的原理是通过DNA,氯化钙与磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA的极小不溶解的磷酸钙颗粒。这些磷酸钙颗粒会粘结到细胞膜上通过胞饮作用进入细胞中,从而达到外源质粒转染进入细胞的目的。磷酸钙转染法主要用于慢病毒包装。由于慢病毒包装需要的质粒量大,脂质体用量大,可能会影响细胞状态。而磷酸钙沉淀法因为试剂易取得、价格便宜而被广泛应用。
磷酸钙法细胞转染试剂盒
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