杀伤辅助因子
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- CAS号:
- 95568-40-4
- 英文名:
- RAT IL-2
- 英文别名:
- IL-2;RAT TCGF;RAT IL-2;proleukin;bioleukin;IL-2, RAT;INTERLEUKIN II;RAT ALDESLEUKIN;RAT INTERLEUKIN-2;INTERLEUKIN 2, RAT
- 中文名:
- 杀伤辅助因子
- 中文别名:
- 白细胞介素-2;T细胞成熟/刺激因子;重组大鼠IL-2蛋白;重组大鼠蛋白IL-2;T细胞生长因子,TCGF
- CBNumber:
- CB2335636
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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杀伤辅助因子性质、用途与生产工艺
化学性质
本品在pH 2.0-9.0范围内稳定,且具有明显疏水性,有利于纯化。在 56℃加热1h仍稳定,实验在37℃放置7天生物活性仍保持。一般保存于-20℃最适宜。具有对热、酶、化学物质的稳定性。IL-2于反应细胞的IL-2受体结合后,可诱导Th细胞增殖;激活B细胞产生抗体;活化巨噬细胞等。
用途
用于治疗艾滋病和肿瘤,且对病毒、细菌、真菌或原虫感染如肝炎、结核病、结节性麻风病等均有一定疗效。
不良反应和禁忌:全身用药可见发热、恶心、呕吐、乏力和不适。偶见面红、寒战、腹泻、水肿和症状性高血压。
生产方法
白细胞提取法
诱生、灭活、分离 用鸡瘟病毒和PHA联合刺激人外周血白细胞,37℃恒温培养。将诱生的白细胞培养液用盐酸(6mol/L)调pH 2.0-2.5,再用氢氧化钠(6mol/L)调回pH 7.2-7.4,离心分离,除杂蛋白,得上清液。
人血白细胞[病毒,PHA]→[37℃]白细胞培养液[6mol/L HCl, 6mol/L NaOH]→[pH2.0-2.5, pH7.2-7.4]上清液
盐析、透析 在上清液加饱和硫酸铵至35%饱和度,4℃静置24h,离心去沉淀,上清液再补加硫酸铵至85%饱和度,4℃静置24h,离心,收集沉淀。将沉淀溶于pH 6.5、10 mmol/L PBS液(内含2%正丁醇和0.15mol/L NaCl),对上述PBS透析除盐24h,5次更换透析外液,得透析液。
上清液[硫酸铵35%、85%饱和度]→[4℃, 24h]沉淀[10mmol/L PBS液]→[pH6.5, 24h]透析液
亲和层析 将渗透液通过蓝色琼脂糖Sepharose 4B层析柱,先用200ml PBS液洗脱不吸附的蛋白质,再用0.4mol/L NaCl的PBS洗涤亲和层析柱,最后用1.0mol/L NaCl的PBS洗脱,收集IL-2活性组分。
透析液[Sepharose4B柱]→[pH6.5]亲和载体[PBS, 1mol/L NaCl]→[pH6.5]IL-2活性组分
凝胶层析 将IL-2活性组分经PEG6000浓缩,上ACA44 Ultrogel柱,用含0.1%PEG、2%正丁醇和pH 7.6的0.5mol/L甘氨酸的Tirs-HCl洗脱,得IL-2成品。
IL-2组分[Ultrogel柱]→[pH7.6]凝胶载体[Tirs-HCl]→[pH7.6]IL-2成品。
杀伤辅助因子
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