CTLA4 IG-24中国仓鼠卵巢细胞性质、用途与生产工艺
CTLA4 IG-24中国仓鼠卵巢细胞是一种实验室常见的贴壁细胞系。1957年,Puck TT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞;广泛用于生物制品的表达。

CTLA4 IG-24中国仓鼠卵巢细胞
CTLA4-Ig-24是一种来自成年雌性中国仓鼠(Cricetulus griseus)的自发永生化细胞系。用人CTLA-4基因(与IgCγ1结构域的铰链、CH2和CH3区融合的细胞外结构域)转染,CTLA4-Ig-24表达具有CTLA4Ig结构域的融合蛋白。
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
1) 来源:中国仓鼠卵巢
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
成纤维细胞样(梭形或多角形)
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;4.将培养瓶放入37度培养箱消化;5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
卵巢;雌性;成年
贴壁细胞
CTLA4 IG-24中国仓鼠卵巢细胞
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