5-甲基四氢叶酸是叶酸代谢通路中将5,10-亚甲基四氢叶酸转化为具有生物学功能的5-甲基四氢叶酸。5-甲基四氢叶酸可以进一步进入甲基传递通路,通过同型半胱氨酸的重新甲基化过程间接为DNA甲基化和蛋白质甲基化提供甲基并且使血液中的同型半胱氨酸水平保持在一个较低的水平。
5-甲基四氢叶酸是叶酸最具生物活性和功能的形式,是叶酸参与生理代谢的唯一途径,也是出现在动物血浆和细胞游离叶酸存在的唯一形式。主要用于药物活性成分和食品添加剂,有预防胎儿神经管缺陷、动脉硬化,治疗巨幼红细胞性贫血,增强氟化嘧啶的治疗效果,治疗例如牛皮癣和风湿性关节炎的自身免疫疾病。