人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA KIT

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA KIT性质、用途与生产工艺

简介

人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA KIT可以特异性检测样本中人乳酸脱氢酶(LDH)的含量，主要用于人乳酸脱氢酶(LDH)的体外定性及定量实验。

原理

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

操作步骤

1.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

3.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

4.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

5.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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