人外周淋巴细胞
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- CAS号:
- 英文名:
- U266B1 Cell
- 英文别名:
- U266B1 Cell;U266 [U266B1]
- 中文名:
- 人外周淋巴细胞
- 中文别名:
- 人外周淋巴细胞;U266B1 CELL|人外周淋巴细胞;U266B1 CELL<人外周淋巴细胞系>;U266B1 CELLS(赠送STR鉴定报告)|人外周淋巴细胞;U266[U266B1] 细胞| U266[U266B1] 人多发性骨髓瘤细胞
- CBNumber:
- CB85432590
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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人外周淋巴细胞性质、用途与生产工艺
人外周淋巴细胞简称PBL,主要是血液循环中的淋巴细胞,主要由T细胞(占70%~80%)和B细胞(占20%~30%)组成。
通常情况下哺乳动物外周血中是没有分裂细胞的,只有在异常情况下才能发现。外周血中的小淋巴细胞几乎都处于G1期或G0期的非增殖状态。体外培养时经一定剂量的植物血凝素(PHA)刺激,T淋巴细胞可转变为淋巴母细胞,重新进入增殖周期,进行有丝分裂。外周血中的淋巴细胞经过68-72小时(三个周期)的短期培养,即可产生大量的增殖期细胞群。
1)抽取人的外周血于肝素抗凝管中,取足5mL新鲜血液,加入PBS按1:1稀释血液(一般采血管2mL+2mL)。
2)取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。
3)吸取稀释血液,在离分层液上方1cm处,沿试管壁徐徐加入,使稀释血液重叠于分层液上,并与分离液形成明显界面。
4)室温,离心2000rpm,20min。此时离心管中形成5层:最上面是血浆,血浆层和淋巴细胞分离液之间是淋巴细胞层呈白膜状。
5)小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层,尽量全部吸出单个核细胞。加5倍以上体积的PBS洗2次,每次离心1500rpm,10min。
6)去上清液,加入1640培养基1mL混匀,取少量进行细胞计数。
7)用台盼蓝染液检查所分离的细胞活性:取2滴细胞悬液加1滴2%台盼蓝染液,5-10min后取样作湿片高倍镜检。活细胞不着色,死细胞染成蓝色。计数200个细胞,计算活细胞百分率,活性应在95%以上。
人外周淋巴细胞
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