姬姆萨染色液

姬姆萨染色液性质、用途与生产工艺

概述

姬姆萨(Giemsa)染料是一种复合性染料，呈中性。目前该染料已成为研究细胞生物学、遗传学的常规染料，尤其在动、植物核型分析、人类染色体病的检查和染色体显带技术中应用最广泛。姬姆萨染色液是一种优良的核染色剂，染色效果较稳定，易被工作者采纳。

制备

姬姆萨染色液制备如下：
1）姬氏原液　取姬姆萨染料(上海试剂三厂)1.0g放研钵中研磨，研细后加入5ml丙三醇继续研磨。充分研溶后，再加入丙三醇61ml(总量66ml)，将研钵放入60℃恒温水浴箱中2小时，促其彻底溶解。取出冷却后，加入甲醇(北京化工厂，AR)66ml，过滤于棕色瓶中，放37℃恒温箱中15～30天，移入室温中长期保存备用。
2）pH6.8～7.4磷酸缓冲液　配制1/15mol/L的KH2PO4和1/15mol/L的Na2HPO4，按所需pH值将二液按一定比例混匀。
3）姬氏染色液(旧)　取1ml原液，加入到一定倍数(9、10、20、40等)的pH6.8～7.4的磷酸缓冲液中混匀即可。
4）姬氏染色液的简易配方　取1ml姬氏原液加入60ml的自来水中(可根据需要，配成小于1∶60的任意浓度)混匀，放37℃水浴箱中或放室温中备用。

应用

用于海带染色体的制备，其步骤是：海带配子体离心后吸除多余水分保留海带配子体沉淀，加入秋水仙素溶液摇匀静置；海带配子体用氯化钾溶液低渗；低渗后的海带配子体用卡诺固定液固定；用纤维素酶R-10溶液、果胶酶溶液、离析酶R-10溶液的混合酶液酶解去壁；海带配子体离心后用移液枪吸除上清液，加入冰乙酸混匀成细胞悬液，用滴管吸取细胞悬液在离预冷的载玻片的上面滴片，载玻片底面经过酒精灯火焰烧一次后自然晾干或烘干；对附着在载玻片上的海带配子体染色体采用姬姆萨染色液染色；显微镜下观察和拍照。本发明得到染色体分散较好，形态可辨且可数的染色体分裂相，方法简便快速，可重复性强，一般实验室均可操作。

用途 

姬姆萨染色液可用于血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。

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