青黛提取物
青黛提取物 性质
青黛提取物以爵床科植物马蓝Baphicacanthus cusia (Nees)Bremek.、蓼科植物蓼蓝Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的叶或茎叶为原料提取，含靛玉红、靛蓝、异靛蓝、色氨酮、青黛酮等成分。具有抗菌、抗癌等药理活性。本信息是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。【基源】为爵床科植物马蓝Baphicacanthus cusia (Nees)Bremek.、蓼科植物蓼蓝Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的叶或茎叶。
【别名】靛花，青蛤粉，青缸花。
【生境分布】生于林下或溪旁阴湿地。分布于台湾、福建、湖南、华南和西南；野生或栽培。
【植物形态】马蓝 叶片长圆形，长5～15cm，灰绿色。叶端渐尖，基部楔形下延，叶缘有细小钝锯齿。
蓼蓝 一年生草本，高50～80cm。茎直立，有分枝，具棱和明显的节，节处带紫红色。单叶互生，托叶鞘圆筒状，具长缘毛，叶片卵形至宽椭圆形，先端圆钝，基部渐狭，全缘，蓝绿色，干后蓝黑色。穗状花序顶生或腋生，长4～8cm，苞片长约3mm，花淡红色，密集，花被片5。瘦果卵形，有 3棱，褐色，包于宿存的花被。花期7～8 月，果期8～9月。
菘蓝 二年生草本，高40～90cm; 无毛或稍有柔毛，茎直立，上部多分枝，稍带粉霜。叶互生，基生叶较大，矩圆状椭圆形，长5～20cm，宽2～9cm，有柄; 茎生叶矩圆形至矩圆状披针形，长5～7cm，宽 1～4cm，先端钝，基部箭形，半抱茎，全缘或有不明显锯齿。复总状花序生于枝端，萼片4，绿色，花瓣4，黄色。短角果矩圆形，扁平，边缘有翅，紫色，无毛。种子1 枚，椭圆形，褐色。花期4～5月，果期5～ 6月。
图1为青黛从菘蓝叶制成的青黛中分出靛蓝 (Indigotin ，Indigo)、靛玉红 (Indirubin )、青黛酮 (Qingdainone )、正二十九烷、吲哚醌(Isatin)、色胺酮 (Tryptanthrin)、青黛素 (Qingdain)。从蓼蓝叶加工成的青黛中分出靛蓝、靛玉红、N-苯基 -2-萘胺(N-Phenyl-2-naphthylamine)、β-谷甾醇、虫漆蜡醇(Laccerol)。从马蓝叶制成的青黛中分出靛玉红、异靛蓝 (Isoindigo)。具有清热解毒，凉血消斑，清肝泻火，定惊之效。
靛蓝：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，金属光泽的深蓝色粉末，300℃升华。溶于水、乙醇、甲醇、稀酸。
靛玉红：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，红色针状结晶(丙酮-丁酮)，熔点356～358℃，可升华，略溶于乙醇、醋酸，不溶于水。
靛玉红具有抗癌作用，临床治疗慢性粒细胞性白血病。1.抗菌作用
青黛乙醇浸出液0.5g/mL体外试验对炭疽杆菌、肺炎杆菌、志贺氏痢疾杆菌、霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌均有抑制作用。青黛成分色胺酮对羊毛状小孢子菌、断发癣菌、红色癣菌、絮状表皮癣菌有抑制作用，其最小抑菌浓度为5μg/mL。
2.对免疫功能的影响
青黛及靛玉红对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有一定的促进作用。对荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬也有促进作用。对慢粒患者的吞噬细胞功能、E-玫瑰花结形成率及双链酶反应无抑制作用，甚或增强。靛玉红200mg/kg，连续6天，能增强荷瘤大鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的作用;100～200mg/kg灌胃，连续43～60天，对豚鼠OT皮试、PHA 引起淋巴细胞转化、巨噬细胞吞噬作用均无明显影响。
3.抗肿瘤作用
青黛及靛玉红对治疗慢性粒细胞白血病有效。靛玉红对大鼠W256实体瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉红200mg/kg，连续 6～7天，结果对大鼠W256实体瘤的抑制率分别为47%～50%和50%～58%。靛玉红500mg/ kg灌胃对大鼠W256实体瘤的抑制率为23%～33%，对小鼠肉瘤180的抑制率约30%。靛玉红能延长淋巴白血病L7212小鼠的生存时间20%左右。靛玉红能抑制癌细胞及人的急、慢性粒细胞性白血病细胞的DNA的合成，使慢粒患者外周白细胞中胆固醇磷脂比值、5′-核苷酸酶、 cAMP量从低值上升至正常，或接近正常，由白细胞Ph′染色体则从高值显著下降，在白细胞骤降期的骨髓细胞中出现大量的幼稚细胞变性、坏死，这主要是通过细胞及胞核溶解而发生，故能破坏白血病细胞，患者骨髓细胞的DNA合成受抑制，尤以中幼粒细胞为明显。长期应用对粒、红系统细胞DNA合成均有抑制作用。靛玉红的衍生物N、N′-二甲基靛玉红、N-甲基靛玉红甲肟、N-甲基靛玉红肟甲醚、N-乙酰基靛玉红对W256均有抑制作用，其化疗指数(LD50/ ID50) 分别为5.6、11、>4、2.5，均大于靛玉红 (化疗指数为2.23)。
4.其他作用
靛蓝对四氯化碳所致小鼠肝损害有一定的保护作用。青黛散对小鼠和大鼠实验性胃溃疡有抗溃疡作用，能减少溃疡面积，抑制胃蛋白酶活性，降低胃液酸度，具有较好的抗胃溃疡作用。1.青黛及靛玉红治疗慢性粒细胞白血病有效。靛玉红有破坏白血病细胞的作用。从超微结构形态来看，在靛玉红作用下，变性坏死的细胞多呈肿胀、溶解性坏死。青黛提取物靛玉红对白血病L7212和Lewis肺癌细胞有直接抑制作用。靛玉红能延长淋巴白血病L7212小鼠的生存时间20%左右。
2.靛玉红对大鼠W256实体瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉红200mg/kg，连续6～7日，结果对大鼠W256实体瘤的抑制率分别为47%～50%和50%～58%。皮下量减少到每日100mg/kg以下时，其抑制作用不明显。靛玉红500mg/kg口服，对大鼠W256实体瘤的抑制率为23%～33%，对小鼠肉瘤S180的抑制率为30%。灌服靛玉红可延长腹水型W256大鼠的生存时间43%。 500ml/kg灌胃，每日1次连续9～10次，对C57BL系小鼠乳腺癌亦有一定抑制作用。
3.靛玉红对艾氏腹水癌、肝癌腹水型有抑制作用。靛玉红能提高正常和荷瘤动物的单核巨噬细胞系统的吞噬功能，可以通过提高机体免疫功能而发挥其抗癌作用。性状鉴别
为深蓝色的极细粉末，体轻，易飞扬，或呈不规则多孔性的团块，用手捻之即为细末。投水中浮于水面。微有草腥气，味淡。以粉细，色蓝，体轻能浮于水面，火烧之产生紫红色烟雾的时间较长者为佳。
理化鉴别
(1)取本品少量，用微火灼烧，产生紫红色的烟雾。
(2)取本品少量，滴加硝酸，产生气泡并显棕红色或黄棕色。
(3)取本品粉末0.5g，加水10ml，振摇后放置片刻，水层不得显深蓝色。
(4)取本品50mg，加氯仿5ml，充分搅拌，滤过，作为供试品溶液。另取靛蓝和靛玉红对照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述二种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮 (5：4：1) 展开。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，分别显相同的蓝色斑点和浅紫红色斑点。
紫外光谱鉴别
青黛的紫外可见光谱
取样品0.4g，置索氏提取器中，加氯仿50ml水浴加热提取至无色，提取液放冷后置100ml 容量瓶中，用氯仿稀释至刻度，于日立UV-320型紫外可见分光光度计上测定其紫外光谱。结果青黛在610nm波长处有最大吸收峰。
图2为青黛的紫外可见光谱图青黛中靛蓝和靛玉红的含量测定
色谱条件
色谱柱：Lichrosorb RP-C18柱(250mm×2.6mm，10μm);流动相：甲醇-水(60：40);流速：1.5ml/min;检测波长：292nm;柱温：室温;内标：色胺酮。
供试品的制备
取本品细粉(150℃干燥2h)约30～80mg，精确称定，加氯仿50ml，置80℃水浴上回流提取20～30min;冷却，静置，取上清液，样品残渣再分次用氯仿提取至无色，合并提取液至100ml量瓶中，加内标，加氯仿至刻度。按本法色谱条件进行测定。
图3为青黛中靛蓝和靛玉红的HPLC图
1内标；2靛蓝；3靛玉红
图4为青黛中靛蓝和靛玉红的含量测定结果(μg/mg)靛玉红小鼠腹腔注射的LD50为1.1～2.0g/kg。小鼠灌胃5g/kg，连续5天，观察1周，结果未见动物发生死亡和出现明显毒性反应。亚急性毒性试验： 给犬分别灌胃靛玉红20、100、200mg/kg连续6个月，结果小剂量组的食欲和生长情况与对照组相似，大、中剂量组出现食欲减少、腹泻、便血以及SGPT升高和灶性肝细胞坏死等反应。但3个剂量组的血象、骨髓象都未见明显抑制，对肾功能、心电图也无影响。有报道复方青黛丸可引起急性肝功损害、便血、溃疡性结肠炎、阴道出血等。内服青黛及靛玉红可出现消化系统的反应，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻、便血等，其次是骨髓抑制引起血小板减少。长期服用靛玉红，少数病人出现肺动脉高压及心功能不全症状，停药后可逐渐恢复。给小鼠灌胃靛玉红后，血中浓度逐渐升高，12小时达到高峰，1天后缓慢下降，维持较长时间。体内分布以肝、胆、胃、肠为最高。生物利用度为46.48%。靛玉红静注或灌胃给药均在肝胆代谢，再随粪便排出体外，给药96小时从粪便排出量占给药量的 76.03%。【性味归经】味咸，性寒。入肝、肺、胃经。
【功能主治】清热解毒，凉血、定惊。用于温毒发斑，血热吐衄，胸痛咳血，口疮，痄腮，喉痹，小儿惊痫。
【别名】靛花，青蛤粉，青缸花。
【生境分布】生于林下或溪旁阴湿地。分布于台湾、福建、湖南、华南和西南；野生或栽培。
【植物形态】马蓝 叶片长圆形，长5～15cm，灰绿色。叶端渐尖，基部楔形下延，叶缘有细小钝锯齿。
蓼蓝 一年生草本，高50～80cm。茎直立，有分枝，具棱和明显的节，节处带紫红色。单叶互生，托叶鞘圆筒状，具长缘毛，叶片卵形至宽椭圆形，先端圆钝，基部渐狭，全缘，蓝绿色，干后蓝黑色。穗状花序顶生或腋生，长4～8cm，苞片长约3mm，花淡红色，密集，花被片5。瘦果卵形，有 3棱，褐色，包于宿存的花被。花期7～8 月，果期8～9月。
菘蓝 二年生草本，高40～90cm; 无毛或稍有柔毛，茎直立，上部多分枝，稍带粉霜。叶互生，基生叶较大，矩圆状椭圆形，长5～20cm，宽2～9cm，有柄; 茎生叶矩圆形至矩圆状披针形，长5～7cm，宽 1～4cm，先端钝，基部箭形，半抱茎，全缘或有不明显锯齿。复总状花序生于枝端，萼片4，绿色，花瓣4，黄色。短角果矩圆形，扁平，边缘有翅，紫色，无毛。种子1 枚，椭圆形，褐色。花期4～5月，果期5～ 6月。
图1为青黛从菘蓝叶制成的青黛中分出靛蓝 (Indigotin ，Indigo)、靛玉红 (Indirubin )、青黛酮 (Qingdainone )、正二十九烷、吲哚醌(Isatin)、色胺酮 (Tryptanthrin)、青黛素 (Qingdain)。从蓼蓝叶加工成的青黛中分出靛蓝、靛玉红、N-苯基 -2-萘胺(N-Phenyl-2-naphthylamine)、β-谷甾醇、虫漆蜡醇(Laccerol)。从马蓝叶制成的青黛中分出靛玉红、异靛蓝 (Isoindigo)。具有清热解毒，凉血消斑，清肝泻火，定惊之效。
靛蓝：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，金属光泽的深蓝色粉末，300℃升华。溶于水、乙醇、甲醇、稀酸。
靛玉红：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，红色针状结晶(丙酮-丁酮)，熔点356～358℃，可升华，略溶于乙醇、醋酸，不溶于水。
靛玉红具有抗癌作用，临床治疗慢性粒细胞性白血病。1.抗菌作用
青黛乙醇浸出液0.5g/mL体外试验对炭疽杆菌、肺炎杆菌、志贺氏痢疾杆菌、霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌均有抑制作用。青黛成分色胺酮对羊毛状小孢子菌、断发癣菌、红色癣菌、絮状表皮癣菌有抑制作用，其最小抑菌浓度为5μg/mL。
2.对免疫功能的影响
青黛及靛玉红对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有一定的促进作用。对荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬也有促进作用。对慢粒患者的吞噬细胞功能、E-玫瑰花结形成率及双链酶反应无抑制作用，甚或增强。靛玉红200mg/kg，连续6天，能增强荷瘤大鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的作用;100～200mg/kg灌胃，连续43～60天，对豚鼠OT皮试、PHA 引起淋巴细胞转化、巨噬细胞吞噬作用均无明显影响。
3.抗肿瘤作用
青黛及靛玉红对治疗慢性粒细胞白血病有效。靛玉红对大鼠W256实体瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉红200mg/kg，连续 6～7天，结果对大鼠W256实体瘤的抑制率分别为47%～50%和50%～58%。靛玉红500mg/ kg灌胃对大鼠W256实体瘤的抑制率为23%～33%，对小鼠肉瘤180的抑制率约30%。靛玉红能延长淋巴白血病L7212小鼠的生存时间20%左右。靛玉红能抑制癌细胞及人的急、慢性粒细胞性白血病细胞的DNA的合成，使慢粒患者外周白细胞中胆固醇磷脂比值、5′-核苷酸酶、 cAMP量从低值上升至正常，或接近正常，由白细胞Ph′染色体则从高值显著下降，在白细胞骤降期的骨髓细胞中出现大量的幼稚细胞变性、坏死，这主要是通过细胞及胞核溶解而发生，故能破坏白血病细胞，患者骨髓细胞的DNA合成受抑制，尤以中幼粒细胞为明显。长期应用对粒、红系统细胞DNA合成均有抑制作用。靛玉红的衍生物N、N′-二甲基靛玉红、N-甲基靛玉红甲肟、N-甲基靛玉红肟甲醚、N-乙酰基靛玉红对W256均有抑制作用，其化疗指数(LD50/ ID50) 分别为5.6、11、>4、2.5，均大于靛玉红 (化疗指数为2.23)。
4.其他作用
靛蓝对四氯化碳所致小鼠肝损害有一定的保护作用。青黛散对小鼠和大鼠实验性胃溃疡有抗溃疡作用，能减少溃疡面积，抑制胃蛋白酶活性，降低胃液酸度，具有较好的抗胃溃疡作用。1.青黛及靛玉红治疗慢性粒细胞白血病有效。靛玉红有破坏白血病细胞的作用。从超微结构形态来看，在靛玉红作用下，变性坏死的细胞多呈肿胀、溶解性坏死。青黛提取物靛玉红对白血病L7212和Lewis肺癌细胞有直接抑制作用。靛玉红能延长淋巴白血病L7212小鼠的生存时间20%左右。
2.靛玉红对大鼠W256实体瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉红200mg/kg，连续6～7日，结果对大鼠W256实体瘤的抑制率分别为47%～50%和50%～58%。皮下量减少到每日100mg/kg以下时，其抑制作用不明显。靛玉红500mg/kg口服，对大鼠W256实体瘤的抑制率为23%～33%，对小鼠肉瘤S180的抑制率为30%。灌服靛玉红可延长腹水型W256大鼠的生存时间43%。 500ml/kg灌胃，每日1次连续9～10次，对C57BL系小鼠乳腺癌亦有一定抑制作用。
3.靛玉红对艾氏腹水癌、肝癌腹水型有抑制作用。靛玉红能提高正常和荷瘤动物的单核巨噬细胞系统的吞噬功能，可以通过提高机体免疫功能而发挥其抗癌作用。性状鉴别
为深蓝色的极细粉末，体轻，易飞扬，或呈不规则多孔性的团块，用手捻之即为细末。投水中浮于水面。微有草腥气，味淡。以粉细，色蓝，体轻能浮于水面，火烧之产生紫红色烟雾的时间较长者为佳。
理化鉴别
(1)取本品少量，用微火灼烧，产生紫红色的烟雾。
(2)取本品少量，滴加硝酸，产生气泡并显棕红色或黄棕色。
(3)取本品粉末0.5g，加水10ml，振摇后放置片刻，水层不得显深蓝色。
(4)取本品50mg，加氯仿5ml，充分搅拌，滤过，作为供试品溶液。另取靛蓝和靛玉红对照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述二种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮 (5：4：1) 展开。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，分别显相同的蓝色斑点和浅紫红色斑点。
紫外光谱鉴别
青黛的紫外可见光谱
取样品0.4g，置索氏提取器中，加氯仿50ml水浴加热提取至无色，提取液放冷后置100ml 容量瓶中，用氯仿稀释至刻度，于日立UV-320型紫外可见分光光度计上测定其紫外光谱。结果青黛在610nm波长处有最大吸收峰。
图2为青黛的紫外可见光谱图青黛中靛蓝和靛玉红的含量测定
色谱条件
色谱柱：Lichrosorb RP-C18柱(250mm×2.6mm，10μm);流动相：甲醇-水(60：40);流速：1.5ml/min;检测波长：292nm;柱温：室温;内标：色胺酮。
供试品的制备
取本品细粉(150℃干燥2h)约30～80mg，精确称定，加氯仿50ml，置80℃水浴上回流提取20～30min;冷却，静置，取上清液，样品残渣再分次用氯仿提取至无色，合并提取液至100ml量瓶中，加内标，加氯仿至刻度。按本法色谱条件进行测定。
图3为青黛中靛蓝和靛玉红的HPLC图
1内标；2靛蓝；3靛玉红
图4为青黛中靛蓝和靛玉红的含量测定结果(μg/mg)靛玉红小鼠腹腔注射的LD50为1.1～2.0g/kg。小鼠灌胃5g/kg，连续5天，观察1周，结果未见动物发生死亡和出现明显毒性反应。亚急性毒性试验： 给犬分别灌胃靛玉红20、100、200mg/kg连续6个月，结果小剂量组的食欲和生长情况与对照组相似，大、中剂量组出现食欲减少、腹泻、便血以及SGPT升高和灶性肝细胞坏死等反应。但3个剂量组的血象、骨髓象都未见明显抑制，对肾功能、心电图也无影响。有报道复方青黛丸可引起急性肝功损害、便血、溃疡性结肠炎、阴道出血等。内服青黛及靛玉红可出现消化系统的反应，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻、便血等，其次是骨髓抑制引起血小板减少。长期服用靛玉红，少数病人出现肺动脉高压及心功能不全症状，停药后可逐渐恢复。给小鼠灌胃靛玉红后，血中浓度逐渐升高，12小时达到高峰，1天后缓慢下降，维持较长时间。体内分布以肝、胆、胃、肠为最高。生物利用度为46.48%。靛玉红静注或灌胃给药均在肝胆代谢，再随粪便排出体外，给药96小时从粪便排出量占给药量的 76.03%。【性味归经】味咸，性寒。入肝、肺、胃经。
【功能主治】清热解毒，凉血、定惊。用于温毒发斑，血热吐衄，胸痛咳血，口疮，痄腮，喉痹，小儿惊痫。