人结肠癌转基因细胞
人结肠癌转基因细胞 性质
人结肠癌转基因细胞是用脂质体法转染相应基因的结肠癌细胞系。细胞系中含有稳定整合的相应基因并具有表达调控等功能。组织来源是结肠癌组织,转染插入目的基因,呈上皮细胞样。
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。