Y187感受态细胞

Y187感受态细胞

中文名称Y187感受态细胞
中文同义词Y187感受态细胞
英文名称Y187 competent cells
英文同义词
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分子式
分子量0
EINECS号
相关类别感受态细胞;基因
Mol文件Mol File
结构式Y187感受态细胞 结构式

Y187感受态细胞 性质

Y187感受态细胞 用途与合成方法

Y187感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating操作,Transformationmarker为:trp1,leu2,报告基因为:lacZ,MEL1,经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μgDNA。Y187-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:pGBKT7和pGADT7。质粒pGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒pGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1~174位氨基酸区段的DNA结合域(DNA-BD)和位于C端768~881位氨基酸区段的转录激活域(AD)。1.取100μl冰上融化的Y187感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5μg,Carrier DNA(95-100度5 min,快速冰浴,重复一次)10μl,PEG/LiAc 500μl并吸打几次混匀,30度水浴30 min(15 min时翻转6-8次混匀)。 2.将管放42℃水浴15 min(7.5 min时翻转6-8次混匀)。 3.5000 rpm离心40 s弃上清,ddH2O 400μl重悬,离心30s弃上清。 4.ddH2O 50μl重悬,涂板,29℃培养48-96 h。

安全信息

MSDS信息

Y187感受态细胞 上下游产品信息

Tag:Y187感受态细胞
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