人毛乳头细胞

毛乳头是细胞中高活性的团体。它来源于真皮的间叶细胞，位于毛囊的基部。毛乳头能控制头发生长周期，诱导表皮毛囊发育并生成毛发纤维。培养早期，毛乳头细胞能诱导毛发体外生长，但进一步培养，该特性消失。毛发生长受到毛囊细胞与间叶上皮细胞间相互作用的调节。例如：毛乳头细胞分泌的β干扰素抑制体外培养中外根鞘细胞的生长。毛乳头细胞的存在也受到信号转导途径的影响，激活的ERK和Akt促进毛乳头细胞的存活。

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。