NEURO-2A] 小鼠脑神经瘤细胞

NEURO-2A]小鼠脑神经瘤细胞该细胞由RJKlebe和FHRuddle建立，来源于AlbinoA系细胞，小鼠的自发瘤；可产生大量的微管蛋白，该蛋白在对神经细胞的轴浆流动起反应的收缩系统中发挥重要作用。OIE组织用该细胞做狂犬病的常规诊断；鼠痘病毒阴性。

NEURO-2A]小鼠脑神经瘤细胞

Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞是由R·J·Klebe和F·H·Ruddle自A/J小鼠大脑组织自生肿瘤建立的具有神经元和变形干细胞形态的小鼠成神经细胞。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞产生大量微管蛋白，此蛋白在神经细胞中起应答轴浆流动的收缩系统作用，细胞也表达乙酰胆碱酯酶基因。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞能够分化成各种类型的神经元。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞可以用于3D细胞培养、高通量筛选、神经科学研究、毒理学研究。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞已用于研究长春碱沉淀微管蛋白的机制、GTP与分离蛋白结合的动力学、体内微管的周转以及微管蛋白合成和组装。世界动物卫生组织（OIE）将这些细胞用于狂犬病的常规诊断。Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]细胞经检测鼠痘病毒呈阴性。1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）小鼠（Mus musculus）脑（Brain）贴壁生长（Adherent）神经母细胞（Neuroblast