常规兔源多克隆抗体制备

抗体的产生，是围绕B淋巴细胞的激活与分化为浆细胞进行的。在首次免疫过程中，抗原首先经多种免疫相关淋巴或巨噬细胞吞噬充分暴露抗原，并将抗原呈递给静止B淋巴细胞，以使其活化，活化后的B淋巴细胞转化为浆细胞，也就是抗体的产生者。由于抗原的表面存在多种抗原识别决定簇，因此在经过免疫相关细胞加工后，呈递给B淋巴细胞的抗原决定簇也是多种多样的，理论上，一个B淋巴细胞只接受一种抗原决定簇，并产生一种对应与之结合的抗体，多个B淋巴细胞就会产生多种识别抗原不同抗原决定簇（也就是表位）的抗体，这些抗体自浆细胞分泌入血液，在血清中大量富集，在数次免疫后，达到浓度和效价的峰值，经过纯化，就成为多克隆抗体。可利用间接还原胺化法制备亲和层析柱，并优化反应条件。运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原，制备兔源多克隆抗体，也包括常规兔源多克隆抗体制备。常规兔源多克隆抗体制备包括以下几步：多肽设计与合成、原核蛋白制备（包括c DNA合成、载体构、蛋白表达与纯化等）、免疫阶段（包括ELISA检测等）、纯化与检测（包括亲和纯化及特异性亲和纯化等）。