怀牛膝提取物
怀牛膝提取物 性质
怀牛膝提取物以苋科植物牛膝Achyranthesbidentata Bl.的根为原料提取，主要活性成分有多糖类、蜕皮甾酮及齐墩果酸型三萜皂苷。具有补肝肾、强筋骨、活血通经、利尿通淋的功效。本信息是由Chemicalbook的侍艳编辑整理。怀牛膝又名牛膝、百倍、鸡胶骨。为苋科植物牛膝Achyranthesbidentata Bl. 的根。分布河南、山西、山东、江苏、安徽、浙江、江西、湖南、贵州等地。
【植物形态】株高30～100厘米。根粗壮，圆柱形，长可达100厘米左右，黄白色，肉质。茎直立，四棱形，分枝，节膨大;疏被柔毛。单叶对生，有柄，叶片膜质，椭圆形或椭圆状披针形，全缘，两面被柔毛。穗状花序，顶生或腋生，花黄绿色。胞果矩圆形。花期8月至9月。果期9月至11月。
图1为怀牛膝1.齐墩果酸型三萜皂苷类化合物
牛膝中齐墩果酸型三萜皂苷大多具有1 ～ 4 个糖残基联接在齐墩果酸的C-3 或/和C-28 位, 形成单糖链或双糖链, 糖链由1 ～ 2 个单糖残基组成, 主要为葡萄糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸。三萜皂苷是怀牛膝中的主要活性成分。
2.甾酮类化合物
牛膝中所含甾酮多为昆虫变态活性甾酮, 目前已分离到的甾酮有:牛膝甾酮(inokosterone)、蜕皮甾酮(ecdy sterone)、旌节花甾酮A(stachy steroneA)、podecdysone C、旌节花甾酮D(stachysterone D)、漏芦甾酮B(rhapontistero ne B)、水龙骨甾酮B(polypo dine B)、2β , 3β , 20β , 22α, 25-五羟基-8 , 14-二烯-胆甾-6-酮、(20R,22R)-2β , 3β , 20, 22, 26-pentahy dro xy-cholestan-7, 12-dien-6-one、achy ranthestero ne A、牛膝甾酮A(achy ranthestero neA)、紫茎牛膝甾酮(rubrosterone , 又名红苋甾酮)。最近又从牛膝盅新发现了3个带呋喃环的甾酮:niuxixinsterone A 、Band C。
3.多糖类化合物
多糖被认为是牛膝的第三类活性成分。其中具有免疫活性的肽多糖ABAB,由(l→4)-D-葡萄糖酸和(l→4)-D-半乳糖酸残基组成主链, 其中肽的含量占24.7%, 主要由甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸和丝氨酸组成。牛膝中水溶性寡聚糖AbS , 由葡萄糖和甘露糖组成。
4.其他类化学成分
怀牛膝中还含有有机酸(Organicacids), 如杜鹃花酸(nonanedioic acid)、琥珀酸(succinic acid)、软脂酸(palmitic acid);生物碱(Alkaloids), 如小檗碱(betherine)、巴马亭(palmatine)、黄连碱(eoptisine)、表小檗碱(epiberberine)、甜菜碱(betaine)；黄酮(Flavonoids), 如芦丁(rutin), 槲皮素-3-O-葡萄糖苷(quercetin-3-O-glucoside)、山柰酚-3-O-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-glucoside);环二肽(Dipeptides), 如:环(酪氨酸-亮氨酸)〔cy clo-(-Pro-Leu)〕和环(亮氨酸-异亮氨酸)〔ey clo-(Leu-Ile)〕;甾醇(Sterols), 如:α-菠甾醇(α-spinasterol)、α-菠甾醇葡萄糖苷、β-谷甾醇(β-sitostero)、胡萝卜苷(daucosterol)、豆甾醇(stigmasterol)以及挥发油(Volatile oil)、氨基酸(Amino acids)、5-羟甲基糠醛(5-hydrox ymethyl furaldehyde)等成分。1.抗肿瘤活性及其免疫增强作用
牛膝多糖在体外增强天然杀伤NK细胞活性和促进伴刀豆球蛋白A (ConA)诱导的肿瘤坏死因子-β(TNF-β) 的产生，但不能提高ConA诱导的T淋巴细胞增殖反应和白介素α的产生。牛膝多糖ip明显提高正常小鼠NK细胞活性和 TNF-β生成，增强二硝基氟苯诱导的迟发型超敏反应和对抗环磷酰胺对NK活性的抑制作用。牛膝多糖ip或ig显著抑制小鼠移植性肉瘤S180生长，提高荷瘤小鼠低下的血清I gG含量和抗体形成细胞数量及脾淋巴细胞增殖反应。对S180细胞无直接细胞毒作用，但能增强MΦ对 S180的杀伤作用。提示牛膝多糖抗肿瘤作用与其增强宿主免疫功能有关。
2.对心血官系统的影响
牛膝醇提液对离体蛙心有抑制作用，对麻醉猫在体心脏也有抑制作用。牛膝煎剂或醇提液静注于麻醉犬、猫、兔等，均有短暂的降压作用，并可使犬肾容积缩小。牛膝水煎液给大白鼠静注，能使下肢血管扩张，血流量增加。牛膝水煎剂灌服，对家兔全血比重无明显影响，但可使血液粘度下降，血流加快。静注亦有类似作用。
3.对子宫的作用
牛膝总皂甙可使动物子宫产生浓度依赖性收缩。对不同生理条件下的大鼠离体子宫均有明显兴奋作用。牛膝总皂甙局部给药，对未孕、中孕家兔在体子宫均有明显兴奋作用。牛膝煎剂及流浸膏亦有类似兴奋作用，对收缩无力的小鼠离体子宫则使收缩加强。
4.抗炎、抗菌及镇痛作用
牛膝抗菌作用不明显，但有较强的抗炎消肿作用，其作用是通过提高机体免疫机能，激活小鼠巨噬细胞系统对细菌的吞噬作用，以及扩张血管，改善循环，促进炎性病变吸收。对于大鼠的甲醛性脚肿，牛膝酒有明显的治疗作用。牛膝水煎液能减轻大白鼠蛋清性脚部炎症。牛膝煎剂对酒石酸锑钾或醋酸所致“扭体反应”有抑制作用，小白鼠口服能延长痛反应时间，表明牛膝具有镇痛作用。
5.对肠管的作用
对于麻醉犬，正常或麻醉兔的胃运动，静注牛膝有轻度抑制作用，对离体小鼠肠管牛膝也呈抑制作用，但对豚鼠肠管则有兴奋作用。
6.蛋白质同化作用
牛膝所含昆虫变态甾体激素具有强的蛋白质合成促进作用，能使小鼠肝脏细胞核、线粒体以及微粒体中氨基酸前体掺入增多。同时肾脏也可见蛋白质合成增强。
7.降血糖作用
促脱皮甾酮等不影响正常血糖，但能使高血糖素，抗胰岛素血清、四氧嘧啶所致高血糖降低，并能改善肝功能，降低血浆胆固醇。还能促进正常小鼠肝脏内葡萄糖转化成蛋白质，以及正常小鼠或四氧嘧啶高血糖小鼠肝脏内葡萄糖合成糖原的作用。
8.护肝作用
怀牛膝对CCl4引起的大鼠SGPT升高有明显降低作用，能促进正常小鼠肝糖原生成。组织学及组织化学显示明显减轻细胞变性和坏死，胞浆内RNA颗粒恢复，电镜观察，线粒体肿胀，内质网囊泡变减轻。
9.抗生育作用
牛膝对妊娠第1～10天的小鼠灌胃有显著的抗生育作用，给妊娠第1～ 5天的小鼠灌胃表现出明显的抗着床作用。牛膝苯提取物对小白鼠亦有明显的抗着床作用。
10.其他作用
牛膝中水溶性部分能抑制过敏介质释放，醇溶性部分则相反。本品还有轻度利尿作用。
图2为总皂苷提取
图3为齐墩果酸提取
【注1】 牛膝皂苷为三萜皂苷，在热水中能溶解，故采用水煎煮提取，但水煎液杂质较多，故需加入 CaCO3粉以阻止过多杂质被煎出，同时可使溶液稍呈碱性，有利于弱酸性牛膝皂苷的提取。
【注2】 文献报道最佳提取工艺为20目药材，加入70%乙醇水浴回流提取1小时，只需一次。
【注3】 加适量CaCO3细粉和6倍量水加热煎煮3次，分别为2小时、1小时、1小时。
【注4】 用3%NaOH溶液煮沸2次，第3次用水煮1次，每次沸腾后即行过滤。
【注5】 加1%活性炭和10倍量95%乙醇回流热溶1小时，趁热过滤，滤液冷却后以HCl调pH1～2，放置24小时，使充分结晶，抽滤干后，以蒸馏水洗至近中性，60℃烘干。
图4为牛膝甾酮、蜕皮甾酮提取【性味】 苦、酸，平。
【功能主治】 补肝肾，强筋骨，逐瘀通经，引血下行。用于腰膝酸痛，筋骨无力，经闭癥瘕，肝阳眩晕。
【植物形态】株高30～100厘米。根粗壮，圆柱形，长可达100厘米左右，黄白色，肉质。茎直立，四棱形，分枝，节膨大;疏被柔毛。单叶对生，有柄，叶片膜质，椭圆形或椭圆状披针形，全缘，两面被柔毛。穗状花序，顶生或腋生，花黄绿色。胞果矩圆形。花期8月至9月。果期9月至11月。
图1为怀牛膝1.齐墩果酸型三萜皂苷类化合物
牛膝中齐墩果酸型三萜皂苷大多具有1 ～ 4 个糖残基联接在齐墩果酸的C-3 或/和C-28 位, 形成单糖链或双糖链, 糖链由1 ～ 2 个单糖残基组成, 主要为葡萄糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸。三萜皂苷是怀牛膝中的主要活性成分。
2.甾酮类化合物
牛膝中所含甾酮多为昆虫变态活性甾酮, 目前已分离到的甾酮有:牛膝甾酮(inokosterone)、蜕皮甾酮(ecdy sterone)、旌节花甾酮A(stachy steroneA)、podecdysone C、旌节花甾酮D(stachysterone D)、漏芦甾酮B(rhapontistero ne B)、水龙骨甾酮B(polypo dine B)、2β , 3β , 20β , 22α, 25-五羟基-8 , 14-二烯-胆甾-6-酮、(20R,22R)-2β , 3β , 20, 22, 26-pentahy dro xy-cholestan-7, 12-dien-6-one、achy ranthestero ne A、牛膝甾酮A(achy ranthestero neA)、紫茎牛膝甾酮(rubrosterone , 又名红苋甾酮)。最近又从牛膝盅新发现了3个带呋喃环的甾酮:niuxixinsterone A 、Band C。
3.多糖类化合物
多糖被认为是牛膝的第三类活性成分。其中具有免疫活性的肽多糖ABAB,由(l→4)-D-葡萄糖酸和(l→4)-D-半乳糖酸残基组成主链, 其中肽的含量占24.7%, 主要由甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸和丝氨酸组成。牛膝中水溶性寡聚糖AbS , 由葡萄糖和甘露糖组成。
4.其他类化学成分
怀牛膝中还含有有机酸(Organicacids), 如杜鹃花酸(nonanedioic acid)、琥珀酸(succinic acid)、软脂酸(palmitic acid);生物碱(Alkaloids), 如小檗碱(betherine)、巴马亭(palmatine)、黄连碱(eoptisine)、表小檗碱(epiberberine)、甜菜碱(betaine)；黄酮(Flavonoids), 如芦丁(rutin), 槲皮素-3-O-葡萄糖苷(quercetin-3-O-glucoside)、山柰酚-3-O-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-glucoside);环二肽(Dipeptides), 如:环(酪氨酸-亮氨酸)〔cy clo-(-Pro-Leu)〕和环(亮氨酸-异亮氨酸)〔ey clo-(Leu-Ile)〕;甾醇(Sterols), 如:α-菠甾醇(α-spinasterol)、α-菠甾醇葡萄糖苷、β-谷甾醇(β-sitostero)、胡萝卜苷(daucosterol)、豆甾醇(stigmasterol)以及挥发油(Volatile oil)、氨基酸(Amino acids)、5-羟甲基糠醛(5-hydrox ymethyl furaldehyde)等成分。1.抗肿瘤活性及其免疫增强作用
牛膝多糖在体外增强天然杀伤NK细胞活性和促进伴刀豆球蛋白A (ConA)诱导的肿瘤坏死因子-β(TNF-β) 的产生，但不能提高ConA诱导的T淋巴细胞增殖反应和白介素α的产生。牛膝多糖ip明显提高正常小鼠NK细胞活性和 TNF-β生成，增强二硝基氟苯诱导的迟发型超敏反应和对抗环磷酰胺对NK活性的抑制作用。牛膝多糖ip或ig显著抑制小鼠移植性肉瘤S180生长，提高荷瘤小鼠低下的血清I gG含量和抗体形成细胞数量及脾淋巴细胞增殖反应。对S180细胞无直接细胞毒作用，但能增强MΦ对 S180的杀伤作用。提示牛膝多糖抗肿瘤作用与其增强宿主免疫功能有关。
2.对心血官系统的影响
牛膝醇提液对离体蛙心有抑制作用，对麻醉猫在体心脏也有抑制作用。牛膝煎剂或醇提液静注于麻醉犬、猫、兔等，均有短暂的降压作用，并可使犬肾容积缩小。牛膝水煎液给大白鼠静注，能使下肢血管扩张，血流量增加。牛膝水煎剂灌服，对家兔全血比重无明显影响，但可使血液粘度下降，血流加快。静注亦有类似作用。
3.对子宫的作用
牛膝总皂甙可使动物子宫产生浓度依赖性收缩。对不同生理条件下的大鼠离体子宫均有明显兴奋作用。牛膝总皂甙局部给药，对未孕、中孕家兔在体子宫均有明显兴奋作用。牛膝煎剂及流浸膏亦有类似兴奋作用，对收缩无力的小鼠离体子宫则使收缩加强。
4.抗炎、抗菌及镇痛作用
牛膝抗菌作用不明显，但有较强的抗炎消肿作用，其作用是通过提高机体免疫机能，激活小鼠巨噬细胞系统对细菌的吞噬作用，以及扩张血管，改善循环，促进炎性病变吸收。对于大鼠的甲醛性脚肿，牛膝酒有明显的治疗作用。牛膝水煎液能减轻大白鼠蛋清性脚部炎症。牛膝煎剂对酒石酸锑钾或醋酸所致“扭体反应”有抑制作用，小白鼠口服能延长痛反应时间，表明牛膝具有镇痛作用。
5.对肠管的作用
对于麻醉犬，正常或麻醉兔的胃运动，静注牛膝有轻度抑制作用，对离体小鼠肠管牛膝也呈抑制作用，但对豚鼠肠管则有兴奋作用。
6.蛋白质同化作用
牛膝所含昆虫变态甾体激素具有强的蛋白质合成促进作用，能使小鼠肝脏细胞核、线粒体以及微粒体中氨基酸前体掺入增多。同时肾脏也可见蛋白质合成增强。
7.降血糖作用
促脱皮甾酮等不影响正常血糖，但能使高血糖素，抗胰岛素血清、四氧嘧啶所致高血糖降低，并能改善肝功能，降低血浆胆固醇。还能促进正常小鼠肝脏内葡萄糖转化成蛋白质，以及正常小鼠或四氧嘧啶高血糖小鼠肝脏内葡萄糖合成糖原的作用。
8.护肝作用
怀牛膝对CCl4引起的大鼠SGPT升高有明显降低作用，能促进正常小鼠肝糖原生成。组织学及组织化学显示明显减轻细胞变性和坏死，胞浆内RNA颗粒恢复，电镜观察，线粒体肿胀，内质网囊泡变减轻。
9.抗生育作用
牛膝对妊娠第1～10天的小鼠灌胃有显著的抗生育作用，给妊娠第1～ 5天的小鼠灌胃表现出明显的抗着床作用。牛膝苯提取物对小白鼠亦有明显的抗着床作用。
10.其他作用
牛膝中水溶性部分能抑制过敏介质释放，醇溶性部分则相反。本品还有轻度利尿作用。
图2为总皂苷提取
图3为齐墩果酸提取
【注1】 牛膝皂苷为三萜皂苷，在热水中能溶解，故采用水煎煮提取，但水煎液杂质较多，故需加入 CaCO3粉以阻止过多杂质被煎出，同时可使溶液稍呈碱性，有利于弱酸性牛膝皂苷的提取。
【注2】 文献报道最佳提取工艺为20目药材，加入70%乙醇水浴回流提取1小时，只需一次。
【注3】 加适量CaCO3细粉和6倍量水加热煎煮3次，分别为2小时、1小时、1小时。
【注4】 用3%NaOH溶液煮沸2次，第3次用水煮1次，每次沸腾后即行过滤。
【注5】 加1%活性炭和10倍量95%乙醇回流热溶1小时，趁热过滤，滤液冷却后以HCl调pH1～2，放置24小时，使充分结晶，抽滤干后，以蒸馏水洗至近中性，60℃烘干。
图4为牛膝甾酮、蜕皮甾酮提取【性味】 苦、酸，平。
【功能主治】 补肝肾，强筋骨，逐瘀通经，引血下行。用于腰膝酸痛，筋骨无力，经闭癥瘕，肝阳眩晕。