酪氨酸脱羧酶
酪氨酸脱羧酶 性质
有研究以pET28a为载体在宿主细胞E．coliBL21(DE3)中重组表达了短乳杆菌来源的酪氨酸脱羧酶，酪氨酸脱羧酶重组表达成功；酪氨酸脱羧酶最佳反应条件为50℃，pH=5.5；但考虑到长时间温度过高对酶活会有影响，所以选取40℃为宜。10mL0.2mol/L醋酸缓冲液中0.9g的酪氨酸与0.1g的菌体细胞反应7h，L-酪氨酸摩尔转化率达99%以上。挑取Origami(DE3)-pET21b-tdc单克隆菌体接入5mL含Amp(100μg/mL)、Kan(50μg/mL)的LB液体培养基中，37℃、200r/min振荡培养过夜。将种子液以2%接种量接种到含Amp(100μg/mL)、Kan(50μg/mL)的LB培养基，于37℃、200r/min的条件下培养，当OD600在0.6~0.8时加入IPTG，使IPTG终浓度为0.5mmol/L，28℃、150r/min诱导培养6h。当对BL21(DE3)plysS-pET21b-tdc进行培养时，抗生素为Amp(100μg/mL)和Cm(30μg/mL)。