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武汉艾美捷科技有限公司

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PNA Bio-KO/KI细胞丨细胞系生成(敲除和敲除)方案

发布日期:2024/5/30 16:09:41发布人:武汉艾美捷科技有限公司

PNA Bio及时提供经济的细胞系生成(敲除和敲除)。工程细胞系生成过程如下所示:

设计并合成4到8个gRNA载体

通过错配敏感的核酸酶检测选择最有效的工程核酸酶

合成报告载体,用于富集基因编辑事件的细胞

优化转染协议

设计基因敲入项目的供体载体

通过MACS(磁珠分选)、FACS(流式细胞分选)或海波霉素抗性进行细胞池的选择(选项:在选定的细胞池中验证效率)

单细胞克隆

使用T7E1检测和/或F-PCR对克隆进行筛选

通过TA克隆和测序确认纯合子基因敲除

 

基因敲除细胞系服务:

提供至少两个独立的基因敲除(KO)克隆,并确认无支原体污染

时间线:4到7个月

 

基因敲入细胞系服务:

提供至少两个独立的克隆,并确认无支原体污染

包括供体载体设计和合成

时间线:5到7个月

 

艾美捷PNA Bio 通过FACS确认基因敲除(示例)

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PNA Bio-KO/KI细胞相关文献:

Enhanced tumor-targeting selectivity by modulating bispecific antibody binding affinity and format valence. Mazor Y et al (2017) Sci Rep 7:40098.

Modeling human epilepsy by TALEN targeting of mouse sodium channel Scn8a. Jones JM & Meisler MH (2014) Genesis 52(2):141-148.

Small molecules enhance CRISPR genome editing in pluripotent stem cells. Yu C et al (2015) Cell Rep 16(2):142-147.

Inhibition of non-homologous end joining increases the efficiency of CRISPR/Cas9-mediated precise [TM: inserted] genome editing. Maruyama T et al (2015) Nat Biotech 33(5):538-542.

ssODN-mediated knock-in with CRISPR-Cas for large genomic regions in zygotes. Yoshimi K et al (2016) Nat Comm 7:10431.

Efficient CRISPR-Cas9-mediated generation of knockin human pluripotent stem cells lacking undesired mutations at the targeted locus. Merkle FT et al (2015) Cell Rep. 11(6):875-883.

 

艾美捷科技是PNA Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。

 

https://www.amyjet.com/brand/PNA-Bio.shtml


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