在线教育培训第二期|3D仿真实训系统——高效液相色谱仪
原创: 普思生物
普思生物 微信公众号号 Pushbiotech
功能介绍 您值得信赖的植化产品与定制服务合作伙伴。四川省天然药物分离纯化工程技术研究中心
具体欢迎阅读(普思生物公众号)
普思生物,虚拟仿真系统
虚拟仿真教学实训系统是针对高等院校学生学习、实训、考核,以及专业分析人员的培训而开发的软件。该软件采用虚拟仿真的技术进行开发,通过搭建三维虚拟仿真实验室,建立一个逼真的3D环境,使实验者产生身临其境的感觉。
使用者在场景中进行灵活的交互式操作,配置仪器中的主要功能模块及工作原理,可灵活设置参数,依据实验操作条件以及仪器的配置,改变条件得到的结果也随之改变。
实验原理
1.1 原理
工作时储液瓶中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经样品进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸得分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱的形式打印出来。
1.2 主要技术参数
1.2.1 四元梯度泵可设置的流速范围:0.001~10mL/min;
1.2.2 进样范围:0.1~100μL,增量为0.1μL;
1.2.3 检测器
噪声:在230nm处,<±0.25×10-5AU;漂移:在230nm处,<1×10-4AU/小时;波长范围:190~600nm;
1.2.4 柱温箱控温范围:室温下10℃ ~ 80℃,带降温功能。
1.3 使用环境
室内照明要光线适中,避免阳光直射。应注意仪器室的通风,以排除室内有害气体、保持空气清新。
一般要求室温在20~30℃之间,日温度变化2~3℃,不要波动太大,否则,在开机分析时会影响色谱分离;室内相对湿度应控制在60%以下。必须要保证稳定的输人电压,为此,建议色谱室应设有和仪器负荷相当的稳压电源。室内墙上应安装有接地电阻符合要求的地线,还要注意保持室内清洁。
2 适用范围
此文件适用于Agilent 1260 HPLC的操作和维护保养。
实验步骤
一、开机前准备
a、明确实验目的,检测样品的性质,选择相应的分析色谱柱;
b、配制分析的样品和流动相,选用色谱纯流动相或用0.22μm的过滤膜过滤,样品也可10000rpm离心10min;
c、检验仪器和计算机的电源线,数据线是否连接完好。
二、开机
a、打开计算机的电源,待计算机运行完全后;
b、依次打开脱气机、泵、柱温箱、检测器的电源开关;
c、待仪器自检完成后,双击桌面上的“Instrument 1 online在线”图标,打开工作站。
三、样品分析
1.溶剂替换与系统平衡
a、配制好的流动相到入溶剂瓶中,并在化学工作站上修改倒入的流动相体积;
b、逆时针转动A/B/C/D泵的排液阀,打开排液阀;设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗5min后再按[pump]键停泵,将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀,如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽;
c、在柱温箱中连接上分析柱,根据分析柱所承受的压力设置平衡流速,替换分析柱的保存液。
2.编辑方法
a、在Instrument online主界面上选择Method→Edit Entire Method;
b、根据提示编辑完所有的参数,设定合适的泵流量和检测器波长;
c、保存所编辑的方法。
3.样品采集与分析
a、在Method & Runcontrol界面上选择上选择File→Load→Method,选择分析方法文件;
b、单针进样:在Method & Runcontrol界面上选择Runcontrol → Sample Infomation,依提示输入保存路径、文件名称、样品名称、操作者等信息,进样时同时按工作站面板上的Start键,即开始样品分析与数据采集;
c、多针进样:在Method & Runcontrol界面上,选择Sequence→Sequence table,输入进样位置、样品名称、分析方法、进样次数、进样量及样品信息等;将准备好的样品置于自动进样器上,选择Runcontrol → Run Sequence,即开始多个样品分析与数据采集。
4.报告输出与编辑
a、在Instrument online主界面上选择View → Data Analysis,进入Data Analysis界面;
b、选择所要处理的数据文件;
c、选择所要选用的报告格式,输出报告。
四、关机
a、分析结束后,点击检测器图标,选择control → off,关闭分析紫外灯;
b、选择合适的流动相,冲洗泵,进样阀,分析柱和检测器;
c、依次关闭化学工作站,仪器各个模块电源和计算机电源。
五、注意事项
a、多相流动相分析时,含盐流动相在上(A、C相),有机相在下(B、D相);
b、水相置于棕色溶剂瓶中,每次使用都要换成新鲜的溶液,防止长菌。
c、仪器运行时,泵头必须用10%异丙醇水溶液虹吸冲洗,不能干涸。