1.办法学的影响
ELISA试剂盒ELISA测定模式包含以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞赛抑制法，其中竞赛抑制法(HBeAb,HBcAb等选用)因受操作时差所引起的竞赛等要素的影响，成果重复性较差，质量较难控制。
2.样本要素
标本干扰要素包含内源性干扰要素和外源性干扰要素，前者包含类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等，后者包含标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时刻过长、标本凝结不全、冷冻标本的反复冻融等。
3.操作要素
ELISA操作进程杂乱，操作不妥将引起较大的差错。加样、温育、洗刷、显色、比色。
4.试剂要素
不同批次的ELISA试剂在制作进程中很难确保质量完全一致，即使是通过批批检的项目其检测成果也存在差异，因而必须挑选和订货长批号的试剂，并确保保存条件。严格执行这一规范可以防止因试剂批号改动而从头树立质控体系及从头评估试剂的杂乱进程，而且可以确保成果的稳定性；关于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，防止反复冻融形成试剂的失效。
5.灰区的设置
ELISA试剂盒通常情况下，ELISA定性试验以“阳性”和“阴性”来陈述成果，两者间有一条分界线被称为“阳性判断值”(cut-off value，CO值)，这是定性免疫测定成果陈述的依据。
6.标本复查
ELISA手工检测进程杂乱，影响要素较多，即使室内质控在控，也或许因孔间差异而形成成果的差异，因而加大复查力度是确保成果准确性的牢靠办法，比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检测成果进行复查。
7.常表示成果的常用办法
a.定性测定
b.半定量测定 成果一般以滴度表示。
c.定量测定 即用已知量的规范品作一系列稀释后进行ELISA测定，绘制规范曲线，成果以量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制相应的规范曲线。