设计ELISA复孔检查时，是对同一个样品作两次稀释，再别离加到板上的两个孔，仍是只稀释一次，然后吸取两次别离加到两个孔？前者似乎把稀释时的差错也考虑到了，但做出来的成果两个孔相关挺大的。而较常运用的是哪种稀释方法？
为了减小差错，是先稀释再加样。而针对这位客户所遇到的疑问，我公司技术人员是这样解说的：
1. 前者测的是稀释和移液的差错，后者只有移液差错。
2. 一般都是稀释一次，分两孔吧。同浓度的分复孔。
3. 由所以从同一原液稀释，一般不考虑稀释差错(稀释差错是存在的)，都是稀释到想要的倍数直接分孔(而不是逐个稀释，这样可以使稀释差错减小)。
4. 复孔是为了排除移液体积，板的影响，以及其他系统差错的，要求复孔的浓度是共同的。稀释后分孔能满意此要求，逐个稀释不能。
ELISA操作技巧
1.操作前应对试验的物理参数有充分的了解，如环境温度（保持在18 C～25℃）、反响孵育温度和孵育时刻、洗刷的次数等，要先检查水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。
2.正确运用加样器加样器应垂直加入标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反响孔壁上，加样器吸头要清洗洁净，避免污染，加样次序要与说明书共同，否则可导致成果错误，试验重复性差。
3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗刷次数不要超越说明书引荐的洗刷次数，洗液在反响孑L内停留的时刻不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，形成孔问污染，导致假阴性或假阳性。
4.要确保加液量共同 咱们在运用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量禁绝，形成显色不统一，判别错误。
5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反响，显色液量不能过多，以免显色过强。