LSC-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肝星形细胞

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细胞背景资料：肝星形细胞；自发永生；Wistar

细胞形态：上皮细胞样

养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞Zui大的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。

细胞生长：贴壁

MB157细胞类似产品：：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞

NB1-RGB细胞类似产品：：D10.G4.1细胞、SW 1116细胞、C-4 I细胞

MFE-296细胞类似产品：：PIG1细胞、H-747细胞、A375mel细胞

PLA801D细胞类似产品：：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞

C4-2B细胞类似产品：：H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞

LSC-1 Cells(赠送Str鉴定报告)|大鼠肝星形细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H2.35细胞类似产品：：LNT-229细胞、CCD1112Sk细胞、Karpas 299细胞

Onda 11细胞类似产品：：SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞

D-324MED细胞类似产品：：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞

ES-2细胞类似产品：：OCI/AML-2细胞、GMK,BSC-1细胞、TOV-112细胞

PK15细胞类似产品：：WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

NCI-H196细胞类似产品：：NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞

MCF-12F细胞类似产品：：COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞

Hs-578T细胞类似产品：：MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞

PIG1细胞类似产品：：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞

Glioma-261细胞类似产品：：BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞

HB 611细胞类似产品：：RPMI #1846细胞、CAL12T细胞、H2405细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较GAO的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不HAO，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很HAO并且不损失细胞！

NCIH2172细胞类似产品：：MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞

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OVCA-433细胞类似产品：：HOS细胞、NCC-IT细胞、Bowes melanoma cells细胞

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H2291细胞类似产品：：RGC-6细胞、H841细胞、HCV-29细胞

NS1-Ag4细胞类似产品：：NCI-H2196细胞、OCI-Ly 3细胞、SW-626细胞

BSC40细胞类似产品：：J 82细胞、HCC-1599细胞、751-NA细胞

NCIH1155细胞类似产品：：LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞

769P细胞类似产品：：AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞

H1666细胞类似产品：：Hs 888.Lu细胞、H-2122细胞、LA795细胞

Hep G2/C3A细胞类似产品：：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞

NBL-4细胞类似产品：：UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞

RH30SJ细胞类似产品：：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞

Murine Lung Epithelial-12细胞类似产品：：OCI-LY-10细胞、2T细胞、SF-763细胞

SCC4细胞类似产品：：COLO 201细胞、Panc 02细胞、TE32细胞

DU 145细胞类似产品：：Fetal Human Lens-124细胞、Tn-5细胞、WB-F344细胞

COR-L26细胞类似产品：：HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、KP-N-NS细胞、Chinese Hamster Lung细胞

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