SW1222 Cells(赠送Str鉴定报告)|人结肠癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

NCIH2228细胞类似产品：：KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞

PG-BE1细胞类似产品：：H-1792细胞、SUPT-1细胞、H510A细胞

NCI-SNU-C2B细胞类似产品：：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞

SHG 44细胞类似产品：：HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞

TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞类似产品：：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到Zui低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

H1876细胞类似产品：：22Rv-1细胞、Mo7e细胞、GC9811-P细胞

LTPA细胞类似产品：：NCIH244细胞、HT-55细胞、NCIH1299细胞

WEHI-3B细胞类似产品：：Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞

P3-X63Ag8.653细胞类似产品：：PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞

HT 1197.T细胞类似产品：：RBSMC细胞、RMS 13细胞、KNS-42细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

Hs294细胞类似产品：：HIT细胞、COLO 201细胞、MDA-MB435细胞

QBC939细胞类似产品：：HRA-19细胞、TE9细胞、C518细胞

H184A1细胞类似产品：：28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞

mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞类似产品：：MC/CAR细胞、HEM-L细胞、HuH6细胞

33604细胞类似产品：：KMS-18细胞、H-711细胞、U118细胞

SKO3细胞类似产品：：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞

细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

OE33细胞类似产品：：HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞

NCIH1666细胞类似产品：：MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞

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PC3-M细胞类似产品：：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞

NCI-ADR-RES细胞类似产品：：Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞

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KU 19-19细胞类似产品：：Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞

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P3 NS1 Ag4细胞类似产品：：Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞

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WM451Lu细胞类似产品：：HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞

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hTERT-HPNE细胞类似产品：：OVCAR-8/ADR细胞、LUDLU1细胞、Lewis lung carcinoma细胞

CemT4细胞类似产品：：HCC-1937细胞、X63-Ag8细胞、GM2219C细胞

NCI-H1651细胞类似产品：：Caco-2/ATCC细胞、NCI/ADRRES细胞、ARO 81-1细胞

ATN1细胞类似产品：：NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞

AtT-20细胞类似产品：：H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞

SNU475细胞类似产品：：NCIH661细胞、BEL7402细胞、SJRH30细胞

Colon-38细胞类似产品：：CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞

N-Tera-2细胞类似产品：：RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞

T98 G细胞类似产品：：Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞

MRMT-1细胞类似产品：：HOEC细胞、AK细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞

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MCF.7细胞类似产品：：SKNEP1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、DH-82细胞

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