PG-4 (S+L-) Cells(赠送Str鉴定报告)|猫星形脑胶质细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。

细胞生长：贴壁

Transformed Human Liver Epithelial-2细胞类似产品：：OKT3细胞、MOLM-13细胞、RAW264细胞

SV40 MES 13细胞类似产品：：DITNC1细胞、OCI-Ly 10细胞、HCC-95细胞

NTERA-2细胞类似产品：：TCMK1细胞、FD-LSC-1细胞、NCI-H378细胞

EoL-1-cell细胞类似产品：：BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞

HCC-1395细胞类似产品：：SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

MDAMB-231细胞类似产品：：KTCTL140细胞、SUM 149PT细胞、PC3-M细胞

MN 60细胞类似产品：：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞

MV-3细胞类似产品：：H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞

NCI747细胞类似产品：：N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞

CV-1细胞类似产品：：CCD 1112SK细胞、HCPEpiC细胞、WiDrTC细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

OC-3-VGH细胞类似产品：：SUDHL-6细胞、PJ34细胞、SUD-4细胞

SK-RC 42细胞类似产品：：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞

SNU368细胞类似产品：：NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞

PL45细胞类似产品：：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞

COV362细胞类似产品：：SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞

A7r5细胞类似产品：：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞

常见细胞培养中一些问题总结：１)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为５%-１５%，不要低于５%或GAO过２０%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过GAO则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为１０%，可以适量加减；２)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；３)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；４)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；５)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；６)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

HTh 74细胞类似产品：：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞

SACC-LM细胞类似产品：：HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞

A2780CP70细胞类似产品：：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞

JKT1细胞类似产品：：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞

HT-115细胞类似产品：：32D.3细胞、HSMC细胞、A-172 MG细胞

ARPE-19细胞类似产品：：CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞

NCI-H1993细胞类似产品：：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞

HEL-92-1-7细胞类似产品：：HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞

NCIH2286细胞类似产品：：IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞

Central Adrenergic TH-expressing a细胞类似产品：：MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞

H9c2(2-1)细胞类似产品：：MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞

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NCI-H2106细胞类似产品：：Institute for Medical Research-32细胞、SK-OV-433细胞、VMM-5A细胞

HT29细胞类似产品：：SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞

Danio rerio Gill细胞类似产品：：SKG-3a细胞、343MG细胞、FHs74Int细胞

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MUG-Chor1细胞类似产品：：Mv1.Lu细胞、L细胞、SW 1783细胞

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COLO-320细胞类似产品：：AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞

PG-4 (S+L-) Cells(赠送Str鉴定报告)|猫星形脑胶质细胞

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JKT1细胞类似产品：：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞

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TE5细胞类似产品：：MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞

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Fetal Rhesus Kidney-4细胞类似产品：：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞

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GM 2132细胞类似产品：：GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞

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Hs 445细胞类似产品：：OP9细胞、TK.10细胞、H-1963细胞

HEK 293FT细胞类似产品：：CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞

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XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品：：GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞

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HL-60 Clone 15细胞类似产品：：HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞

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IPLB-SF 21AE细胞类似产品：：SKO3细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、HCC-2108细胞

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H211细胞类似产品：：UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞

TCCSUP细胞类似产品：：DiFi细胞、FOX-NY细胞、KYSE-70细胞

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SK N SH细胞类似产品：：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞

3LL细胞类似产品：：HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞

OSC-19细胞类似产品：：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞

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