NCI-H676B Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺腺癌细胞

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细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：上皮细胞样

【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在GAO压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠GAO盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。

细胞生长：贴壁

SKNBE-2细胞类似产品：：Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞

CCD 1112SK细胞类似产品：：OVCAR-432细胞、OV1-P细胞、H-1650细胞

MEG-01细胞类似产品：：NCI-H165细胞、CAL 33细胞、LOU-NH91细胞

TCC-SUP细胞类似产品：：NTERA-2/D1细胞、COLO824细胞、SK-RC-20细胞

ATDC5细胞类似产品：：L23/P细胞、RGC-6细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞

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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养过程中的“六要”“三不要”“三勤”：有的人认为细胞培养很难，经常一不留神就把细胞污染了，牢记细胞培养中的六“要”三“不要”三“勤”让你成功培养出你想要的细胞！六“要”：1、拿到新细胞的时候要做HAO支原体检测，不管是买的细胞、惠赠的细胞，并迅速扩增冻存。2、离开细胞房的时候要给细胞房照紫外，超净台要用完就开紫外。3、离开过操作台的东西再进入操作台之前一定要用酒精喷一遍，包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。4、培养基的话Zui多不要超过2天就要换一次。细胞可以不传代，但是培养基是一定要换的。5、发现有污染要迅速处理掉，别是同时养了很多种细胞; 细菌污染、真菌污染很容易发现（这两种污染绝对是环境中带来的，多注意一下卫生条件是可以杜绝的），支原体污染的话，细胞会长的慢，若是珍贵的细胞可以买个支原体清除剂杀一杀，还是可以挽救的。6、冻存细胞复苏后第二天要更换一次培养基。三“不要”：1、不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套。2、不要怕浪费，枪头什么的只要有可能污染就换，如果用酒精灯就什么都稍微烤一下。3、身体的各个部分不要接触不需要接触的地方。比如实验台，又比如培养箱内部。三“勤”：1、勤换水，水浴锅很脏，细胞培养箱要是得手动加湿的话，盘里的水也会很脏。那种公用的水浴锅、培养箱，定期换水习惯不HAO的，交叉污染严重的，那就可以选择一些绿色、安全、无刺激性的除菌剂，改善一下，免得细胞遇到污染时措手不及。2、勤擦洗，培养箱隔一段时间彻底用安全除菌剂擦洗一次，有人用酒精擦洗，但毕竟究竟只能除掉细菌，对于真菌是没有办法杀死的，所以这里推荐大家选用效果和口碑都不错的除菌剂处理。3、勤清洁，细胞房日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸。养细胞就像打仗，知彼知己，百战不殆。做到以上几点，细胞培养易如反掌，导师再也不用担心我的细胞养死了。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

F36P细胞类似产品：：MiaPaCa-2细胞、WM-266-4细胞、373MG细胞

NCIH446细胞类似产品：：Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞

THLE2细胞类似产品：：7860细胞、SCC90细胞、SNK-6细胞

SACC-LM细胞类似产品：：HIEC6细胞、HCC-1187细胞、Tu-177细胞

Panc08.13细胞类似产品：：PC-3M-1E8细胞、MEL-526细胞、NIH3T3-L1细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

CoC1细胞类似产品：：D324细胞、L540细胞、74Int细胞

HOSEpiC细胞类似产品：：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞

GM04679细胞类似产品：：HEK-2细胞、CO115细胞、SK-RC-42细胞

Mahlavu细胞类似产品：：Sp2/0-Ag14细胞、MB468细胞、HO-1-N-1细胞

TH1细胞类似产品：：A9(Hamprecht)细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、SC1细胞

MNNG细胞类似产品：：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞

造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Zui常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°CGAO压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不HAO，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且HAO几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求GAO，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！

细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带HAO防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)ZuiHAO选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较GAO，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不HAO离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰HAO稀释到了无害浓度。

ARH 77细胞类似产品：：UMUC-14细胞、MDA-453细胞、HET1A细胞

NP69细胞类似产品：：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞

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NCI-H676B Cells(赠送Str鉴定报告)|人肺腺癌细胞

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343 MG细胞类似产品：：SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞

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QGY-7701细胞类似产品：：CMT 93细胞、CAL 12T细胞、U20S细胞

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