K-562 Cells(赠送Str鉴定报告)|人慢性髓原白血病细胞

"K-562 Cells(赠送Str鉴定报告)|人慢性髓原白血病细胞

细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞形态：淋巴母细胞样

接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。

细胞生长：悬浮

DMS 153细胞类似产品：：Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞

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K-562 Cells(赠送Str鉴定报告)|人慢性髓原白血病细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞培养更HAO经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很HAO，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很HAO时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

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MCF7/WT细胞类似产品：：MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

K-562 Cells(赠送Str鉴定报告)|人慢性髓原白血病细胞

细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分

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细胞接收后的操作流程与注意事项：１)如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加１５%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养３天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为１５%血清的完全培养基培养３天。３天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决；２)贴壁细胞生长缓慢；适当提GAO血清浓度(ZuiGAO不能超过２０%)，或可根据该细胞生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养；３)生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养。

细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有３５L和５０L两种。使用时要注意以下几点：(１)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-１９６℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(２)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(３)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更HAO。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(１２１°C蒸气GAO压消毒)，２mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天ZuiHAO换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０６～１×１０７/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记HAO细胞名称和冻存日期，同时作HAO登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装HAO细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，Zui后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。

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CAL 85-1细胞类似产品：：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞

LIXC-002细胞类似产品：：B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞

GI-1细胞类似产品：：SUDHL-10细胞、SW-1088细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞

MFE 280细胞类似产品：：C57 Mouse Tumor 64细胞、SK ES 01细胞、HCC-1833细胞

COLO-16细胞类似产品：：OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞

OUMS-23细胞类似产品：：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞

CaSki细胞类似产品：：HSF2细胞、EL 4细胞、KMS26细胞

SK-LMS-1细胞类似产品：：HNE1细胞、Panc02.03细胞、801-D细胞

LS-123细胞类似产品：：Hs 739.T细胞、KTC1细胞、TE-13细胞

SW 480细胞类似产品：：Balb/c 3T3细胞、H1417细胞、MDA-435细胞

H-2110细胞类似产品：：NKM1细胞、NKL细胞、HEK293T/17细胞

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