C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

贴壁细胞冻存注意事项：细胞冻存液需提前配制，不可直接将DMSO加入细胞悬液中；不同细胞消化时间有差异，以实际镜检结果为准，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，消化时间不宜过长；应选择汇合度80%-90%左右，细胞处于对数生长期时进行冻存操作，确保细胞冻存时状态Zui佳，冻存密度可根据细胞性进行调整；冻存细胞保存温度应低于-130℃，不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤：从培养箱中取出准备冻存的细胞；显微镜下观察细胞状态并拍照记录；酒精消毒培养瓶后放入安全柜中；吸去多余的培养基，加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；将细胞悬液移入15ml离心管中离心，1000rpm/min（约200g）离心3-5min；吸去多余的液体，向细胞沉淀中加入适量的冻存液，轻轻吸打混匀；按比例分装至冻存管中；贴HAO标签后放入梯度冻存盒中；将冻存盒放入-80℃，降温过夜后，移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项：将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用；程序降温盒复温至室温备用。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

CTLL(2)细胞类似产品：：KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞

HN 4细胞类似产品：：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞

Caco2-BBE细胞类似产品：：Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞

MDA-453细胞类似产品：：JCA1细胞、CHP-100细胞、Caco-2/BBe 1细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：胶质细胞株C６是由Benda等用N-nitrosomethylurea诱导的大鼠胶质瘤克隆，并经过一系列的体外培养和动物传代交替后建成的。 当细胞从低密度生长到满瓶时，S-１００产量增加１０倍。

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细胞形态：上皮细胞样

SK N SH细胞类似产品：：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞

Roswell Park Memorial Institute 8226细胞类似产品：：Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞

SK-MEL-3细胞类似产品：：HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞

培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。

SNU-C2B细胞类似产品：：MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞

DMS-53细胞类似产品：：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞

PLA801-95C细胞类似产品：：NCI-HUT-292细胞、SK Mel 1细胞、H841细胞

P815细胞类似产品：：SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞

NSC34细胞类似产品：：NTera 2/cl.D1细胞、H.Ep. #2细胞、LC1-Sq细胞

HCCLM3细胞类似产品：：HAEC细胞、Panc_03_27细胞、EB-3细胞

OCI/AML5细胞类似产品：：ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞

Co 205细胞类似产品：：Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞

CAL-12T细胞类似产品：：BEL-7404细胞、RF/6A细胞、NCI-HUT-292细胞

Centre Antoine Lacassagne-62细胞类似产品：：MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞

OV3121细胞类似产品：：BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞

CAL-148细胞类似产品：：253J-Bladder-V细胞、T-47-D细胞、COLO680N细胞

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751-NA细胞类似产品：：EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞

T98细胞类似产品：：SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞

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CCD1112Sk细胞类似产品：：NB1RGB细胞、BL6细胞、MV-4:11细胞

TE-8细胞类似产品：：Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞

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293H细胞类似产品：：SMC-1细胞、HEK (AD293)细胞、MSB-1细胞

U-251MG细胞类似产品：：SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞

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Madison 109细胞类似产品：：NCI-BL2141细胞、SK RC 52细胞、H510细胞

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Walker-Ca.256细胞类似产品：：Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞

10T1/2细胞类似产品：：BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞

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NS1-Ag 4/1细胞类似产品：：Meat Animal Research Center-145细胞、AMO-1细胞、ESC细胞

C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Fetal Human Lens-124细胞类似产品：：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞

D407细胞类似产品：：NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞

7404细胞类似产品：：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞

MDAMB134细胞类似产品：：HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞

MUGCHOR1细胞类似产品：：no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞

7404细胞类似产品：：4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞

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