RNA 提取试剂盒 （纯化柱型）
一、产品简介。
RNA 提取试剂盒（纯化柱型）是一款利用 RNA 纯化柱与相关裂解-漂洗缓冲液组成的 RNA 提取系统，同时利用 gDNA 去除柱去除基因组 DNA，快速提取高纯度的 RNA。
二、运输与存储条件。
本产品常温运输与保存，有效期 12 个月。
三、特点与优势。
1. 本产品可以快速（20 min）提取 RNA。
2. gDNA 去除柱可以有效去除基因组 DNA，得到高纯度的 RNA。
3. 本试剂盒无需酚/ 氯仿抽提，及氯化锂或异丙醇沉淀，显著提高实验操作的安全性。
四、自备试剂与耗材。
无水乙醇，70%乙醇，RNase-free EP 管（1.5 mL）和枪尖。
五、使用说明。
1. 试剂配制。在 Wash Buffer B（漂洗液）中加入 35 mL 无水乙醇，混匀。
2. 细胞和组织裂解。
1) 细胞裂解。
a) 贴壁细胞裂解。胰酶消化法收集细胞并计数，按照细胞数量添加一定体积的裂解液，混匀，室温裂解 3 min。或根据细胞培养皿大小，直接加入裂解液，吹打混匀，转移到 EP 管中，室温裂解 3 min。
b) 悬浮细胞裂解。离心收集悬浮细胞并计数，按照细胞数目添加一定体积的裂解液，混匀，室温裂解 3 min。
2) 动物组织裂解。组织块称重后加入液氮冷冻，研磨成粉末后转入 EP 管，加入裂解液，剧烈震荡（vortex）20 秒；或将组织块加入裂解液中，利用手持式匀浆器破碎组织，室温裂解 3 min，再12,000×g，4℃离心 3 min，弃沉淀，上清转移至新的 EP 管，即为组织裂解液。
3. 将细胞裂解液或组织裂解液上清转入 gDNA 去除柱，12, 000×g，4℃离心 30 sec，弃 gDNA 去除柱，保留滤液（含有 RNA）。
4. 向滤液中加入等体积的 70%乙醇，混匀，转入 RNA 纯化柱，12,000×g，4℃离心 30 sec，弃滤液。
5. 向 RNA 纯化柱中加入 500 μL Wash Buffer A（去蛋白液），12,000×g，4℃离心 30 sec，弃滤液。
6. 向 RNA 纯化柱中加入 500 μL Wash Buffer B（漂洗液），12,000×g，4℃离心 2 min，弃滤液。
7. 将 RNA 纯化柱插入新的 RNase-free 的 EP 管中，向柱中央滴加 100 μL Elution Buffer R （洗脱液）或 RNase-free ddH2O，室温静置 2 min。
8. 12,000×g，4℃离心 2 min，得到 RNA 溶液，立即用于反转录实验，或保存于-80 ℃冰箱中。
六、注意事项。
1. RNA 易降解，请在低温条件下提取 RNA。
2. 本产品提取的 RNA 包括 28 s 和 18 s RNA，不含 5 s RNA。因此，本产品不用于 microRNA 提取。
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