NCI-H28:人恶性间皮瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

HCA 7细胞类似产品：：H-292细胞、GC1-SPG细胞、AR4-IP细胞

H-2126细胞类似产品：：A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞

Panc_05_04细胞类似产品：：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞

A-673细胞类似产品：：NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H28:人恶性间皮瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

MCA205细胞类似产品：：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞

MBT-2细胞类似产品：：HEY-A8细胞、HT-1376细胞、EC109细胞

BALB/3T3 (clone A31)细胞类似产品：：OVCAR5细胞、MUTZ3细胞、BNL CL2细胞

细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握HAO细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性HAO，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点，要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。

细胞传代方法：１：３-１：６传代，每周换液２-３次

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

L细胞类似产品：：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞

HLFa细胞类似产品：：H1563细胞、SNU-398细胞、H2196细胞

COLO_320DM细胞类似产品：：HANK-1细胞、SUDHL-8细胞、H22细胞

MES-23.5细胞类似产品：：P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞

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CORL279细胞类似产品：：MILE SVEN1细胞、SR细胞、U87 MG细胞

H-35 Reuber细胞类似产品：：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞

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SW 1463细胞类似产品：：HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞

NCI-522细胞类似产品：：SR细胞、He La细胞、TE14细胞

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RPMI8226细胞类似产品：：TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞

Line 870 Emory University-4细胞类似产品：：CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞

AMO-1细胞类似产品：：Th17细胞、SSP-25细胞、VP303细胞

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COLO 320细胞类似产品：：THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞

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38C-13细胞类似产品：：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞

VSMC细胞类似产品：：Hce8693细胞、Calu3细胞、IGROV 1细胞

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Hu-P-T4细胞类似产品：：COV362细胞、697细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞

H-1373细胞类似产品：：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞

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细胞

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NCI-H28:人恶性间皮瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞类似产品：：GM04671细胞、RKOE6细胞、CW2细胞

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