H9c2(2-1):大鼠胚胎心肌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

CAL-33细胞类似产品：：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞

SNU520细胞类似产品：：H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞

NCI-H2087细胞类似产品：：SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞

HS 683T细胞类似产品：：NCI-H522细胞、U266细胞、3T3-Swiss细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：详见相关文献介绍

H9c2(2-1):大鼠胚胎心肌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

NIHOVCAR3细胞类似产品：：FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞

MADISON LUNG TA-109细胞类似产品：：PK136细胞、MIA PaCa-2细胞、C666-1细胞

SF 126细胞类似产品：：B16/BL6细胞、BSC-1细胞、SUM102细胞

细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，Zui后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒：包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长　

贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。

HLE细胞类似产品：：PLC细胞、D10G41细胞、NB4细胞

L-6TG细胞类似产品：：P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞

NCI-H1836细胞类似产品：：GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞

COLO320HSR细胞类似产品：：H2110细胞、SuDHL 4细胞、H2073细胞

L929细胞类似产品：：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞

MZ-CRC-1细胞类似产品：：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞

KYSE 520细胞类似产品：：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞

SLK细胞类似产品：：SUM-52-PE细胞、SK_N_BE2C细胞、CAMA细胞

MHCC97细胞类似产品：：SK N SH细胞、BPH1细胞、LN299细胞

GC1-SPG细胞类似产品：：SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞

AtT-20细胞类似产品：：H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞

HuT-78细胞类似产品：：LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞

526细胞类似产品：：SK-RC-52细胞、LUDLU-1细胞、H548细胞

HT144mel细胞类似产品：：MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞

KYSE0030细胞类似产品：：hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞

OSC-19细胞类似产品：：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞

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OCI/AML5细胞类似产品：：ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞

Capan1细胞类似产品：：SK-RC-20细胞、UWB1-289细胞、HRMC细胞

A498细胞类似产品：：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞

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OCI-AML-5细胞类似产品：：SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞

MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞类似产品：：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞

NCI660细胞类似产品：：87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞

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Helacyton gartleri细胞类似产品：：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞

Psi-2-DAP细胞类似产品：：EAC-E2G8细胞、IEC-6细胞、OKa-C-1细胞

SP2细胞类似产品：：CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞

C-32细胞类似产品：：EST81细胞、Cloudman M3细胞、UK Pan-1细胞

SKml2细胞类似产品：：P3/X63-Ag8细胞、C-32细胞、MOLM16细胞

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Hs729T细胞类似产品：：NIHOVCAR3细胞、EJ细胞、MDA361细胞

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HCC1428细胞类似产品：：P-388细胞、CTLL-2细胞、NR8383.1细胞

BHK 21细胞类似产品：：NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞

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NCI-460细胞类似产品：：CAL12T细胞、GFP-Olig2细胞、MKN-7细胞

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KYSE140细胞类似产品：：H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞

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LAN-5细胞类似产品：：GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞

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TN5B14细胞类似产品：：MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞

TPC-1细胞类似产品：：OUMS23细胞、D407 RPE细胞、RTE细胞

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H-526细胞类似产品：：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞

G-292细胞类似产品：：U-CH1细胞、NCTC clone 1469细胞、H-647细胞

H9c2(2-1):大鼠胚胎心肌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

NCI H716细胞类似产品：：OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞

SCC-15细胞类似产品：：MKN 28细胞、SK-MEL-1细胞、OB2细胞

SK UT 1细胞类似产品：：SNU216细胞、HD11细胞、MN60细胞

Strain V细胞类似产品：：NeHepLxHT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、SUDHL6细胞

3T3 L1细胞类似产品：：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞

P30/0HK细胞类似产品：：UMUC3细胞、H2107细胞、293 Ad5细胞

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