U-251MG:人神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

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细胞生长：贴壁

可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

293-F细胞类似产品：：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞

SL-29细胞类似产品：：MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞

Okayama University Medical School-23细胞类似产品：：OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞

SW620细胞类似产品：：Granta 519细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、Vero-76细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

细胞背景资料：U-２５１ MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。

U-251MG:人神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)

细胞形态：上皮细胞样

SNU-251细胞类似产品：：NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞

MC-3T3-E1细胞类似产品：：NUGC-4细胞、Mo 59J细胞、NCI-SNU-182细胞

OCI-AML3细胞类似产品：：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞

购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。

细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁

公司是一家专注于生物医药的科研产品研究、开发、生产和销售的GAO科技企业。公司自成立以来，收录了近两千种各类细胞系，公司细胞主要来源ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell等，以及少数国外科研机构建系。客户遍及全国各地的医院、GAO校、药厂、科研机构等。细胞常规说明：培养条件：89%基础培养基+10%FBS+1%双抗；冻存液成分：92%FBS+8%DMSO；传代建议：1:2~1:3传代，2~3天换液1次；别提醒：签收细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据。接收到细胞后，用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。培养细胞前，多了解贴壁情况(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用培养基、血清比例、传代比例、换液周期等相关细胞信息。

NCI-H1385细胞类似产品：：TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞

hFOB细胞类似产品：：H.Ep. No. 2细胞、NCI-446细胞、COV 504细胞

NBL-12细胞类似产品：：PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞

T-98G细胞类似产品：：COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞

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Namalwa细胞类似产品：：A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞

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KATO III细胞类似产品：：MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞

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