疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒,Borrelia spp.
  • 疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒,Borrelia spp.

疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒

价格 3980
包装 1盒
  • 最小起订量1盒
  • 发货地上海
  • 发布时间2022-06-23

产品详情

  • 中文名称:疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒
  • 英文名称: Borrelia spp.
  • 保存条件: -20度
2022-06-23 疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒 Borrelia spp. 1盒/3980RMB 3980 -20度

疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒产品特点

  • 即开即用,用户只需要提供病毒样品。


2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。

3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。

4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。

5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。

6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。 



1Q.jpg


低温运输、-20℃保存,有效期一年。


DNA 模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。


疏螺旋体(包柔螺旋体)通用染料法荧光定量PCR试剂盒使用方法

一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)

1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

二、样品 DNA 的制备

8. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 上步制备的 PCR 阳性对照的第 4号(浓度为 1×10E4 拷贝/μL,10μL 相当于 1 万拷贝)或第 5 号(浓度为 1×10E5拷贝/μL,10μL 相当于 10 万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。如果每次制备需要 200μL 样品,则 PC 和 NC 的体积也必须是 200μL用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。本试剂盒免费赠送 15 次一管式病毒 DNAout

三、设置 qPCR 反应(20 μL 体系,在样品制备室进行)

10. 如果只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照,6 个用于 PCR 阳性对照。如果做 2-3 次重复,则反应设置数量相应增加 2 或 3 倍。

11. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后最后加):


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注:仅 ABI7500、7700 和 7900 仪器需要使用 ROX 作为对照,其他荧光 PCR 仪 器(如 iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene 3000、RotorGene 6000 和 LightCycler480)不需要使用 ROX,则用水替代


盖上盖子后上机,按下面参数进行 PCR(具体 PCR 参数可以根据仪器不同而自行优化)。

过程 温度 时间

3E.jpg

13. 数据采集

具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时,最大吸收光谱在 471 nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm,最大发射光谱在 530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。

四、数据处理

14. 如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值,再推算出其浓度。

15. 如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性,如果小于 40,则为阳性。

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公司简介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域, 科研机构、高校、院所及企业产品开发 研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学,通过公司各 个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户的厚爱,本着"优质、服务、信誉”的精神,坚持 以先进的技术、优质的产品、良好的信誉,为国内外广大用户提供优质生物产品和一流的服务,。公司在重视产品质量 的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门]的全方位的服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的 服务提供给每-个客户本研究所郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到,公司总投资超过2000万元,并先后引进了 自动化设备,组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质管理系统,为生产高质量的产品提 供了有效保证。雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评,后 在权威杂志文章中被引用。
  • 上海雅吉生物科技有限公司
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  • 公司成立:12年
  • 注册资本:50.000000万人民币
  • 企业类型:有限责任公司(自然人投资或控股)
  • 主营产品:抗体,细胞,生物试剂等
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