水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
亚硝酸盐广泛存在于水体和土壤中，不仅是有机氮分解的重要中间产物，也可能来自污染。人体摄入过量后，可诱发消化系统癌变。
水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒测定原理：
在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在540nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，室温保存。
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃避光保存。
样品处理：
1. 土壤样品：准确称取过筛后的土壤约1g，加入2 mL 提取液，室温震荡1h，8000g，25℃离心15min，静置，待其分层后，取上清液待测。
2. 水样：直接检测；如果浑浊，可以离心后再测定。
测定步骤和操作表：
| 空白管 | 测定管 |
样品（µL） |
| 1000 |
试剂一（µL） | 500 | 500 |
试剂二（µL） | 500 | 500 |
H2O | 1000 |
|
混匀，25℃静置15min，1mL玻璃比色皿，空白管调零，测定A540 |
注意：空白管只需测定一次。
亚硝酸盐含量计算：
标准曲线回归方程为：y= 0.011x + 0.0216，R2= 0. 9991
（1）土壤样品：NO2-（μmoL/g）=（A540测定管 -0.0216）÷0.011×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3=
×（A540测定管 - 0.0216）÷W
（2）水样：NO2-（μmoL /mL）=（A540测定管 -0.0216）÷0.011×V反总÷V样×10-3
=×（A540测定管 - 0.0216）
V样总：加入提取液体积，2mL；V反总：反应总体积，2 mL；V样：反应中样品体积，1mL； W：样品质量，g
水土中亚硝酸盐含量测定试剂盒注意事项：
1. 试剂盒2-8℃保存。
2. 试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。
3. 最低检出限为1.97μmoL /L。
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