植酸(Saponin )含量试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
植酸(Saponin )含量试剂盒测定意义:
植酸又称肌酸、环己六醇六全-二氢磷酸盐,它主要存在于植物的种子、根干和茎中,其中以豆科植物的种子、谷物的麸皮和胚芽中含量最高。植酸作为螯合剂、抗氧化剂、保鲜剂、水的软化剂、发酵促进剂、金属防腐蚀剂等,广泛应用于食品、医药、油漆涂料、日用化工、金属加工、纺织工业、塑料工业及高分子工业等行业领域。
测定原理:
磺基水杨酸-氯化铁溶液显紫红色,在500nm下有吸光值。在pH6.0-6.5的环境下,植酸和铁离子结合使溶液颜色变淡,测定吸光度的降低来检测植酸含量。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、烘箱、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、金属震荡仪、蒸馏水
试剂的组成和配制:
试剂一:50ml×1瓶,4℃保存;
试剂二:25mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:50mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:15mL×1瓶,4℃保存。
植酸提取:
样本烘干,粉碎过筛,称取0.05g,加入1mL试剂一,震荡提取2h;8000g,25℃离心10min,取上清0.5mL,加入0.5mL试剂二,混匀后4℃静置2h,离心取上清待测。
植酸(Saponin )含量试剂盒测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至500nm,蒸馏水调零。
2、测定管:取100μL上清,加入900μL试剂三,混匀后取750μL加入1mL玻璃比色皿,再加入250μL试剂四,充分混匀后500nm下测定吸光值A1。
3、空白管:取100μL蒸馏水,加入900μL试剂三,混匀后取750μL加入1mL玻璃比色皿,再加入250μL试剂四,充分混匀后500nm下测定吸光值A2。ΔA=A2-A1。
空白管只要做一管。
植酸含量计算:
标准状态下的回归曲线为:y =4.0568x + 0.0096,R2 = 0.993;X为植酸钠标准品浓度(mg/mL),y为吸光值ΔA(A2-A1)。
植酸含量(mg/g干重)=(ΔA-0.0096)÷4.0568×V反总÷V样÷(W÷V样总) =4.93×(ΔA-0.0096)÷W
V反总:测定液总体积,1mL;V样:加入反应体系中样本体积,0.1mL; V样总:加入提取液总体积,
2mL;W:样本干重,g。
注意事项:
若ΔA高于0.4,说明样本植酸浓度过高
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