1.售前须知:
1、该细胞推荐使用Leibovitz's L-15培养基进行培养,Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,会产生细胞毒性; 2、该细胞不建议更换为DMEM培养,圆形较多,效果不好。
2.细胞起源:
细胞简称 SW480 [SW-480]
细胞别称 SW-480; SW 480; SW480E
细胞背景描述 SW480 [SW-480]细胞源自原位直肠腺癌,和SW620细胞源自同一病人一年后的淋巴结转移。CSAp和直肠抗体3阴性;角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。细胞p53蛋白表达水平提高,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性,癌基因N-myc的表达未做检测。SW480 [SW-480]细胞不表达细胞溶解酶,一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称,SW480 [SW-480]细胞表达GM-CSF。SW480 [SW-480]细胞ras原癌基因的12位密码子有一个突变,可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。1978年11月,A·Leibovitz将其提交给ATCC时已传代至第91代。
供体年龄 男性,50岁
组织来源 直肠;结直肠腺癌
细胞形态 上皮细胞样
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 肠癌细胞
生长特性 贴壁细胞
生物安全等级 1
3.培养及保藏:
完全培养基 Leibovitz's L-15(PM151010)+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培养环境 空气,100%
37℃
冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮
4.传代方法:
传代步骤
1、吸出原培养液;
2、加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm/min 3分钟,离心完吸出上清丢弃;
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
消化时间 2~3分钟
传代比例(密度) 1:2-1:4
换液频次 2~3次/周
倍增时间 ~30-50小时
本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。