AP Blotting AMPPD ECL 是一种含 AMPPD 及增强剂的超灵敏碱性磷酸酶（AP）化学发
光底物，可直接用于硝酸纤维素膜（NC membrane）上的蛋白质或核酸印迹。该底物与 AP
混合后，底物立即发生分解反应释放出光子，发光平台期长。本产品的低本底发光与高强度
光输出相结合，能够以尽可能高的灵敏度和信噪比检测碱性磷酸酶标记。AP Blotting AMPPD
ECL 为荧光底物甲基伞形酮磷酸酯(MUP) 和比色底物 pNPP 提供了高度敏感的替代品，以
卓越的灵敏度、速度和简便性检测 AP 及其标记的分子。
目录号 Art no: CLBM-0050/ 0100/ 0250
包装规格 Package size: 50mL/ 100mL/ 250 mL
保质期 Shelf life: 1.5 years
储 存 Storage: 2-8℃ 避光
应 用 Application: Western blot / Northern blot
用法说明 Instruction:
以膜面积为 100cm2 的 Western blot 为例：
1.膜封闭：印迹膜转移后，用 PBS 或 TBS 短暂冲洗印迹，然后在 10mL 封闭液中孵育 30-
60 分钟；注：PBST 或 TBST 可用于洗涤 NC 膜或 PVDF 膜。对于尼龙膜，TBST 的背景比
PBST 略高。
2. 孵育一抗：在 5mL 封闭液中稀释一抗至厂家推荐浓度，孵育 30-60 分钟；
3. 洗涤：对于 NC 膜和尼龙膜，在 20 mL 洗涤液（PBST/TBST）中洗涤至少 5 分钟×3 次；
4. 孵育二抗：在 5mL 封闭液中稀释 AP 标记的二抗至 1:50000，孵育 30-60 分钟；
5. 洗涤：与步骤 3 一样洗涤 5 分钟×3 次，然后用 20mM Tris (含 1mM MgCl2, pH9.8) 洗涤
膜 2 分钟×2 次；
6. 去除洗涤液：沥干膜上的洗涤液，注意不要让膜变干；
7. 底物孵育：将 3mL 底物溶液加到印迹膜表面，孵育 5 分钟；
8. 去除底物液：沥干底物溶液，并将膜放在显影夹中或用塑料包裹，小心去除气泡或褶皱；
9. 膜成像：建议初始曝光 5-30 分钟，PVDF 或尼龙膜曝光时间膜通常比 NC 膜时间更短。
关键字： AP 膜发光底物;
多睿思特（深圳）医疗科技有限公司（Durastab Medtech Ltd）是由国内外专业技术人才联合创立，致力于生物检测技术和IVD原料试剂开发、生产、销售于一体的生物技术企业，为体外诊断、生物医药和科研高校提供高品质工业级原料试剂。
公司拥有进口化学发光分析仪、紫外可见分光光度计、酶标分析仪、生物芯片检测仪、喷金划膜仪、胶体金检测仪、免疫荧光检测仪、高功率紫外激光等研发设备，公司总面积2000m2，建设有万级、十万级洁净车间近1000m2。
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