中文名:二氢罗丹明123
英文名:Dihydrorhodamine 123
纯度:BioReagent,生物染色剂,适用于荧光分析,用于显微镜,5 mM in DMSO,Fluorescence Analysis,细胞染色
货号:D1520930
Cas号:109244-58-8
存储温度:避光,-20°C储存
运输条件:超低温运输
稳定性存储:Store at -20℃ long term (12 months). Store in the dark.
产品介绍:
二氢罗丹明123 (DHR123)是一种不带电荷且无荧光的活性氧 (ROS)指示剂,可以跨膜扩散,进入细胞后如果有氧自由基,它在线粒体中被氧化成罗丹明123阳离子,呈现绿色荧光 (Ex/Em=507/529 nm)。DHR123常用来检测内皮细胞、嗜酸性细胞和反应性小胶质细胞产生的活性氧中间物。
染色程序:
(1) 用培养基稀释5mM DHR123 溶液,稀释50倍得到100 µM DHR123工作液。
(2) 准备两批HL60细胞,细胞密度~6×10⁶ 个/mL缓冲溶液为Krebs-Ringer buffer.
(3) 将HL60细胞十分之一体积的DHR123工作液加入两批HL60细胞中,DHR123终浓度为10 µM,并在37 ℃下孵育30分钟。
(4) 其中一批HL60细胞与DHR123培养后,加入氧自由基诱导剂phorbol 12-myristate 13-acetat (PMA)终浓度50 µM。
(5) 另一批HL60细胞加入SNARF-1 AM acetate (SNARF-AM)探针终浓度5 µM在37°C培养10 min,离心用并用培养液洗涤细胞。
(6) 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。
注意事项:
(1) 溶液现配现用。
(2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套。
参考文献:
Lydia M. Henderson et al. Dihydrorhodamine 123: a fluorescent probe for superoxide generation. Eur.J.Biochem. 217, 973-980.
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