中文名:ROS荧光探针-DHE
英文名:ROS fluorescent probe DHE
货号:R353922
Cas号:38483-26-0
存储温度:避光,-20°C储存
运输条件:超低温运输
产品介绍:
ROS 荧光探针-DHE
产品规格:1 mL(5 mM in DMSO)
产品参数
Ex/Em: 355/420 nm
CAS号:38483-26-0
分子式:C21H21N3
分子量:315
储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。
产品介绍
DHE(Dihydroethidium),可自由透过活细胞膜进入细胞 内,并被细胞内的 ROS 氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可 掺入染色体 DNA 中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧 光的产生,可以判断细胞 ROS 含量的多少和变化。DHE 在 细胞内主要被超氧阴离子型 ROS 氧化,用流式细胞仪或荧 光显微镜可直接观察,是一种快速简便的组织或培养活细胞 中 ROS 经典检测方法。
使用说明
1. 染色方法: (1)探针溶液可在新鲜培养液、缓冲盐溶液或组织灌流液中稀释到所需浓度,以此染色液更换细胞培养液或灌流液; 也可直接向细胞孵育液或灌流液中加入探针至所需浓度。 (2)依据细胞ROS含量的不同,DHE终浓度可选择在1 μM~100 μM的范围,孵育时间可选择10~90 min。孵育可在 37℃或室温进行,要求避光。 (3)孵育结束后,用新鲜溶液清洗细胞或组织。 2. 荧光显微照相操作方法: (1)对贴壁生长细胞或活组织,可直接在荧光显微镜下观 察;对悬浮生长细胞,取25-50 μL细胞悬液滴到一张显微载 玻片上,再盖上一张盖玻片。 (2)荧光显微镜下,用蓝光或绿光激发,观察和拍摄细胞 红色发射图像,ROS阳性细胞在整个核区被染成红色;用紫 外光激发时,胞浆中未氧化的DHE可发出蓝色荧光。 3. 流式细胞分析操作方法: (1)对贴壁生长细胞,用胰酶消化制备成单细胞悬液;对 悬浮生长细胞,直接收集细胞。用0.5~1 mL冰冷PBS重悬细 胞(5~10万)。 (2)采用 480~535 nm 波长激发,测定 590 nm~610 nm 以 上的发射,细胞应可分成两个亚群:ROS 阴性细胞仅有很 低的荧光强度,ROS 阳性细胞有较强的红色荧光。
注意事项
1. DHE在光照和空气中易被氧化,注意避光保存。 2. 该试剂可用于体外培养活细胞、培养或灌流组织及组织 冰冻切片的检测。 3. 对不同的细胞和组织,应选择合适的孵育时间和浓度, 以观察 ROS 的变化。
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