中文名:热启动Taq DNA 聚合酶
英文名:Hot Start Taq DNA Polymerase
纯度:5U/μL
货号:H292167
包装:10ku、1ku、5ku
存储温度:-20°C储存
产品介绍:
产品说明:
Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration是一种适体基团修饰的耐热性TAQ DNA聚合酶,高温加热前,适体修饰基团与Taq酶结合,抑制聚合酶的活性,避免了引物延伸的非特异性扩增或引物二聚体的产生,增强了DNA扩增的特异性、灵敏度和稳定性,可广泛适用于常规PCR、多重PCR及巢式PCR等。经过95℃热激10min后,该酶即可恢复活性。此外 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration没有检测到3'→5'校对外切酶活性,但具有5'→3'外切酶活性,可用于荧光定量PCR的检测。Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration在常温下没有活性,便于PCR实验的常温操作。
产品内容:
1. Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration (10 U/μl )
2. 5×Hotstart Taq Buffer( Mg²⁺ Plus)
3. Solution I (10×)
活性定义:74℃,30 min,使 10 nmol dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为 1 个活性单位。
使用方法:
1. PCR 反应体系的设置:
a. 溶解并混匀 PCR 反应所需的各种溶液。并放置于冰浴上或冰盒内。建议反应 PCR 液体分装使用,避免反复冻融。
b. 参考下表设置 PCR 反应,建议 PCR 反应体系的配置在冰浴或在冰盒上进行:
※ 模板 DNA 用量:为了保证反应的灵敏性,25 μl 体系使用 10⁴ 拷贝的靶序列作为模板,可参考下表计算需加入 PCR 体系的模板量。
1 μg 各种来源的 DNA 对应的摩尔数
例如:纯化的人类基因组 DNA 浓度为 1 μg/μl,某基因在人类基因组中拷贝数为 10,其单位体积拷贝数为:
3.0× 10⁵ mol/μg × 1 μg/μl × 10 copy/mol
=3.0× 10⁶ copy/μl
1× 10⁴ copy/ (3.0× 10⁶ copy/μl)
= 1/300 μl
即:1/300 ul 浓度为 1 ug/μl 的人类基因组 DNA 中含 10⁴ 拷贝该基因,稀释 300 倍后加 1μl 至 25 μl PCR 体系。为保证反应的特异性,DNA 终浓度应小于 10 ng/ul,过多的 DNA 可能会出现涂抹带甚至无特异性条带。
c. 用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀,室温离心数秒,使液体积聚于管底。
d. 各设置好的 PCR 反应管置于 PCR 仪上,开始 PCR 反应。
2. PCR 反应参数的设置:
本产品是经过适体修饰型 Hotstart Taq DNA Polymerase High-concentration,为了使 PCR 的扩增效率、定量精度等达到最佳,建议热激时间为 95℃ ,10 分钟
3.产品包装:
产品组成 | 1KU | 5KU | 储存温度 | Hotstart Taq DNA Polymerase (5 U/μl ) | 200μl | 1ml | -20℃ | 5×Hotstart Taq Buffer(Mg2+ Plus) | 4ml | 20ml | -20℃ | Solution I (10×) | 2ml | 10ml | -20℃ |
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关键字: 热启动Taq DNA 聚合酶;Hot Start Taq DNA Polymerase
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