土壤中性木聚糖酶(S-NEX)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,NEX 一般分离自最适生长 pH 为 6-8 的微生物。
测定原理:
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 NEX 活力。
自备仪器和用品:
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。测定操作表:
对照管
测定管
土样(g)
0.1
缓冲液(μL)
600
400
试剂一 (μL)
200
混匀,50℃震荡反应 30min ,立即 90℃水浴 10min ,8000g ,25℃离心 10min ,取上清 500μL
试剂二(μL)
500
混匀,90℃水浴中显色5min,蒸馏水调零,1mL 玻璃比色皿测定 540nm 处吸光值 A ,分别记为 A 对照管、
A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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