氨含量测定试剂盒微板法/96样产品简介:
氨可由微生物蛋白质分解代谢产生,此外肝脏疾病也会影响氨水平。
本试剂盒利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液颜色稳定。其在 630nm 处有特征吸收峰,吸光值与氨含量成正比。试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体6mL×1瓶
试剂二
液体3mL×1瓶
试剂三
A:液体 1.7mL×4 支
B:液体 0. 1mL×1 支
临用前取 15μL 的 B 液进一瓶 A 液中,混匀后作为试剂三使用。混匀后的试剂三一周内用完。
标准管
液体 2mL×1 支
标品浓度为 10μg/mL 的氨
所需的仪器和用品:酶标仪、96 孔板、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
氨含量检测:建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
① 液体样品:
澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。
② 组织样本:
取约 0. 1g 组织样本,加 1mL 的提取液研磨,粗提液全部转移到 EP 管中,12000rpm,常温离心 10min ,上清液待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1 :5~ 10 的比例进行提取。
③ 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W ,超声 3s ,间隔 10s ,重复 30 次);12000rpm 4℃离心 10min ,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)为 500~ 1000:1 的比例进行提取。
上海酶联生物科技有限公司
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