4-香豆酸：辅酶A连接酶(4CL)测定试剂盒/分光光度法/24样

4-香豆酸：辅酶A连接酶(4CL)测定试剂盒/分光光度法/24样

测定意义：

4CL  是连接苯丙酸途径与木质素特异合成途径的关键酶，主要催化肉桂酸生成相应的肉桂酸辅酶 A  酯，是合成木质素与其他苯丙烷类化合物的代谢流向调控点。该酶主要存在于高等植物、酵母和菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量而提高其品质提供依据。

测定原理：

4CL  催化 4-香豆酸和 CoA  生成 4-香豆酸 CoA，在 333nm   下测 4-香豆酸 CoA  生成速率，即可反映 4CL活性。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL  石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

1 、 分光光度计 40℃预热 30min   以上，调节波长至 333nm，蒸馏水调零。

2 、 样本测定

（1）在试剂二中加入 12.5mL  试剂一充分溶解混匀，置于 40℃水浴预热 10min；现配现用（配好后 24h   内用完）；

（2） 测定管：在 1mL  石英比色皿中加入 50 μL  样本和 950 μL  试剂二，混匀，立即记录333nm  处 40℃反应 30min  后的吸光值 A2。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。