二氢黄酮醇还原酶(DFR)测定试剂盒/微量法/48样
测定意义:
二氢黄酮醇还原酶是类黄酮合成途径中的一个关键酶,在决定植物的花色、叶色、果色和其他经济器官的色泽及其营养品质方面起着重要作用。
测定原理:
二氢黄酮醇还原酶作用于二氢槲皮素产生儿茶素,可与香草醛缩合形成红色化合物,在 500nm 处有特征吸收峰。
自备仪器和用品:
研钵、低温离心机、震荡仪、氮吹仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、水浴锅、无水乙醇、乙酸乙酯、浓盐酸。测定操作表:
对照管
测定管
酶液(μL)
40
试剂一 (μ L)
120
试剂二(μL))
20
试剂三(μL)
混匀,30℃反应 30min
乙酸乙酯(μL)
200
37℃震荡 10min,取上层溶液,N2 吹干
无水乙醇(μL)
100
充分震荡
试剂四( μL)
300
混匀,25℃静置 10min,于微量石英比色皿/96 孔板中测定 500nm 处吸光值 A。分别记为 A 对照管和 A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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