1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)测定试剂盒/24样
测定原理:
在 Rubisco 的催化下,1 分子的核酮糖-1,5-二磷酸(RuBP)与 1 分子的 CO2 结合,产生 2 分子的 3-磷酸甘油酸(PGA) ,PGA 可通过外加的 3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脱氢酶的作用,产生甘油醛-3-磷酸,并使还原型辅酶Ⅰ(NADH)氧化。因此,340nm 吸光度的变化可计算还原型辅酶Ⅰ氧化速率,还原型辅酶Ⅰ氧化速率可反映 Rubisco 的活性。
自备仪器和用品:
可见-紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml 石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2、样本测定:
工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三 1:1 混合,用多少配多少;在 1ml 石英比色皿中,加入 50ul样本、50ul 试剂四和 900ul 工作液,立即混匀,记录△340nm 处 20s 时吸光值 A1 和 5min20s 时的吸光值 A2,计算 A=A1-A2。
上海酶联生物科技有限公司
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