锐博生物专利：高灵敏度小RNA定量检测方法及试剂盒. 授权专利号：CA201410039162.6
Bulge-Loop™ miRNA qRT-PCR
1、高特异性，采用具有茎凸环结构的逆转录引物以和高特异miRNA正向引物，确保该方法的特异性，能准确检测出高度同源的miRNA
2、高灵敏度，比传统的miRNA 定量检测方法具有更宽广的动态变化范围，无需担心因样品量少或者miRNA 表达量低而无法精确检测
3、高准确性，可验证微阵列表达谱数据的准确性，有效地检测出miRNA 表达量，且重复性高。
Bulge-Loop miRNA颈环法引物套装包括：Bulge-Loop RT primer、Forward primer和Reverse primer。
miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR
1、灵敏度高，精确定量miRNA表达量
2、特异性好，甚至可准确区分miRNA 成熟链和前体
3、节省样本，一次转录可同时检测多种miRNA 及其他各种RNA
4、适用于各种样品的miRNA 表达谱检测
miDETECT A miRNA加尾法引物：Forward Primer。
miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR能够准确检测miRNA表达量，并在较宽的定量区间内得到很好的标准曲线，检测限度从1fM 至100pM，适合进行miRNA 准确定量检测。
以 6 个数量级连续梯度（1fM, 10fM, 100fM, 1pM, 10pM, 100pM）稀释的miRNA 标准品（hsa-miR-16、hsa-miR-21）进行miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR 检测，每个梯度3 个平行样，扩增效率（E）超过96%，检测相关性（R2）达到1.00，灵敏、准确。
miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR 采用特异性优化的设计算法，能够将单个样品中的多种RNA 通过通用的Poly(A) Tailing 和Uni-RT 反应，及特异性qPCR 检测，可准确区分序列相似的miRNA 成熟链，重复性好，可信度高，甚至能区分大部分成熟体和前体。
分别以8 个10pM 的miDETECT™ miRNA qRT-PCR Standard RNA 为模板，采用8 种miDETECT A Track™ miRNA引物进行特异性qRT-PCR 检测，结果表明仅对应的miRNA 引物能够特异性检测，无非特异性扩增现象出现。
A：miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR 检测扩增曲线; B：引物特异性统计分析结果
由于对样品进行的Poly(A) Tailling 和Uni-RT 具有通用性，所以经过一次反转录得到的产物即可检测mature miRNA、miRNA precursor、snoRNA、snRNA、piRNA、lncRNA 和mRNA ( 注：引物需要特殊设计) 等多种RNA，检测结果准确且重复性高。
样品中总RNA 采用miDETECT A Track™ miRNA qRT-PCR 方法检测miRNA(hsa-miR-638、hsa-miR-760、hsa-miR-1207、hsa-miR-4281)，snRNA(U6)，lncRNA(7SL1) 为模板，准确定量检测多种RNA 的表达量。